盲腸結扎穿孔膿毒癥致急性肺損傷大鼠肺泡巨噬細胞與血管內皮細胞變化及相關性研究.pdf

1、目的：本實驗采用盲腸結扎穿孔膿毒癥致急性肺損傷模型，動態(tài)觀察膿毒癥大鼠早期肺泡巨噬細胞變化與肺臟血管內皮細胞損害情況，初步探討兩者是否具有一定的相關性及其可能機理。
　　 方法：SD大鼠66只，雌雄不拘，隨機分為3組：（1）正常對照組（n=6），動物于麻醉后，稱重，經(jīng)腹主動脈采血，采用酶聯(lián)免疫分析法檢測血清E-選擇素，腫瘤壞死因子-α（TNF-α）水平。大鼠處死，分離雙肺，反復沖洗肺泡3次，收集肺泡灌洗液，采用酶聯(lián)免疫分析法測定

2、巨噬細胞炎癥蛋白-1α（MIP-1α）水平，采取少許肺中葉組織行電鏡觀察血管內皮細胞（VEC）和肺泡Ⅱ型上皮細胞（ATⅡ）損傷情況，用電子秤稱量肺臟濕重，于80℃烤箱留存48h后，稱量肺臟干重。并計算肺濕重/干重（W/D）、肺系數(shù)、肺水含量；（2）假手術組（n=30），動物麻醉后行盲腸探查術后關閉腹腔，分別于術后3h,9h,24h,36h和48h五時點行與正常對照組相同的操作步驟，每時相點6只大鼠；（3）膿毒癥組(n=30)，動物行盲腸

3、結扎穿孔（CLP）術后3h,9h,24h,36h和48h五時點行與正常對照組相同的操作步驟，每時相點6只大鼠。
　　 結果：1.膿毒癥組在CLP術后3h肺泡灌洗液MIP-1α水平即升高，與正常對照組和假手術組相比差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05），且逐步升高，在24h達峰值（1.45±0.34 ng/ml），在36h時點有下降表現(xiàn)，但仍高于正常對照組和假手術組（p<0.05）。2.血清TNF-α水平在CLP術后即明顯高于正常對照組

4、與假手術組（p<0.01），在24h達峰值（390.94±27.70 pg/ml），隨后有下降趨勢，但仍顯著高于正常對照組和假手術組（p<0.01）。3.CLP術后3h血清E-選擇素水平開始升高（0.26±0.02ng/ml），顯著高于正常對照組與假手術組（p<0.05），在24h達峰值（0.40±0.01ng/ml），隨后有下降趨勢，但仍高于正常對照組和假手術組（p<0.05）。4.肺臟濕重/干重（W/D）值、肺系數(shù)、肺水含量在CLP

5、術后均明顯高于正常對照組（p<0.05）和假手術組（p<0.05），隨時間推移，比值逐漸上升，且在各時間點均明顯高于正常對照組（p<0.01）與假手術組（p<0.05）。以上指標在假手術組術后各時間點均明顯高于正常對照組（p<0.05），有統(tǒng)計學意義。5.電鏡下觀察肺臟血管內皮細胞（VEC）和肺泡Ⅱ型上皮細胞（ATⅡ）在膿毒癥發(fā)展過程中損害逐漸加重，且根據(jù)《黎鰲燒傷學》血管內皮超微結構損傷評分標準，內皮細胞損傷程度隨時間推移分值逐漸增高

6、。ATⅡ正常形態(tài)維持其正常功能，本實驗中ATⅡ正常形態(tài)逐漸破壞。6.肺泡灌洗液巨噬細胞炎癥蛋白-1α與血清E-選擇素采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包分析，兩者存在顯著正相關，F(xiàn)=5.557，P<0.05，相關系數(shù)為0.407，P<0.01.得回歸方程為：y(MIP-1α)=0.504+1.814x（E-selectin）.
　　 結論：1.在膿毒癥致急性肺損傷發(fā)病過程中，肺泡巨噬細胞可能有助于加大肺臟的炎癥損傷，而高炎癥狀態(tài)，可增