組織工程-人正常食管上皮細胞的培養(yǎng).pdf

1、目的：在體外分離、培養(yǎng)食管上皮細胞，是研究組織工程食管的最基本環(huán)節(jié)。尋找適用于組織工程食管研究的食管上皮細胞培養(yǎng)方法。 方法：實驗于2007年5月/2007年11月在蘭州大學醫(yī)學實驗中心完成。①實驗材料：取食管癌患者手術切除的正常食管長2.0～3.0cm，患者對實驗知情同意。②實驗方法：獲取可用于組織工程的食管上皮細胞，常規(guī)傳代培養(yǎng)。⑧實驗評估：免疫組織化學染色、倒置相差顯微鏡下觀察培養(yǎng)20min，1～4d細胞在含血清培養(yǎng)基DM

2、EM+F12(1:1)中的生長情況；四甲基偶氮唑鹽法測繪1～6d細胞生長曲線。 結果：①免疫組織化學方法檢測結果顯示，90％以上細胞呈陽性，證明培養(yǎng)的細胞為食管上皮細胞。②正常細胞較大，呈球形懸浮于培養(yǎng)基中；約20min后開始貼壁，1d后大部分細胞貼壁生長并呈不規(guī)則圓形或多邊形；2d后細胞開始成簇生長；三四天細胞達生長高峰，胞漿豐富，核大而圓。③培養(yǎng)第3天細胞生長達高峰，其吸光度值與第1，2，5，6天比較，差異有顯著性意義(P<