山核桃MADS轉(zhuǎn)錄因子的H2Y分析和活性組織表達(dá)水平檢測(cè).pdf

1、成花是開(kāi)花植物生命周期中一個(gè)重要的生理轉(zhuǎn)變過(guò)程,MADS-box基因在高等植物成花時(shí)間和花器官形態(tài)建成過(guò)程中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。MADS-box轉(zhuǎn)錄因子是MADS基因功能的直接行使者,通常以同源或異源二聚體形式發(fā)揮作用。本實(shí)驗(yàn)基于山核桃雌花芽轉(zhuǎn)錄組454測(cè)序,克隆得到了幾個(gè)CcMADS基因的開(kāi)放閱讀框,并進(jìn)行了初步研究,得到以下結(jié)論。
　　1.多序列比對(duì)和進(jìn)化樹(shù)分析表明,得到的CcMADS屬于典型的植物MADS-typeⅡ,分別

2、命名為CcAP1(AHI85952), CcSVP(AHI85951), CcSOC1(AHI85950), CcTM;這些MADS轉(zhuǎn)錄因子具有明確的MIKC分區(qū),其中有高度保守的M區(qū)和相對(duì)保守的K區(qū)。
　　2.CcTM不同組織的實(shí)時(shí)定量PCR(qRT-PCR)實(shí)驗(yàn)顯示,CcTM在根、莖中未檢測(cè)到表達(dá),在葉、花芽中大量表達(dá),尤其是花芽中高出7-10倍,暗示其可能在成花過(guò)程中發(fā)揮作用。
　　3.酵母雙雜交(H2Y)實(shí)驗(yàn)表明,山

3、核桃AP1和SVP、AP1和FLC1、AP1和FLC2、SVP和FLC1、FLC1和FLC2組合蛋白兩兩相互作用,且CcAP1、CcSVP、CcFLC1、CcFLC2存在自我相互作用。CcSOC1表現(xiàn)一定程度的“惰性”,不與包括自己在內(nèi)任何CcMADSs相互作用。
　　4.CcSOC1結(jié)構(gòu)域的H2Y實(shí)驗(yàn)表明,M區(qū)的存在似乎阻礙了CcSOC1二聚化的形成,K區(qū)的存在表明了CcSOC1仍然有形成同源或異源二聚體的潛力。
　　5.