雌激素對膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型發(fā)病過程的作用.pdf

1、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)是一種慢性系統(tǒng)性自身免疫疾病,其基本病理特征表現(xiàn)為滑膜炎、關(guān)節(jié)滑膜炎癥細(xì)胞浸潤、滑膜細(xì)胞異常增殖、血管翳形成以及關(guān)節(jié)軟骨和骨損傷等。文獻(xiàn)報(bào)道RA患者以女性居多,男女患者比例約為1:4。女性RA患者的臨床癥狀在月經(jīng)周期的排卵后期和妊娠期得到緩解。RA患者滑液(synovial fluid,SF)中雌激素產(chǎn)生增加且與雄激素的比例增大。以上證據(jù)表明雌激素影響RA的病理過程。肽基精酰

2、胺脫亞胺基酶(peptidylarginine deiminase4,PADI4)是RA的一個(gè)重要關(guān)聯(lián)基因,主要通過瓜氨酸化作用將蛋白質(zhì)中的精氨酸殘基轉(zhuǎn)變?yōu)楣习彼釟埢?進(jìn)而引起RA自我免疫反應(yīng)和關(guān)節(jié)組織破壞。研究人員發(fā)現(xiàn)雌激素可上調(diào)PADI4的表達(dá),提示雌激素可能通過調(diào)節(jié)PADI4的表達(dá)參與RA的病理途徑。TXNDC5(thioredoxin domain containing protein-5,TXNDC5)屬于硫氧還蛋白(thio

3、redoxin,TRX)家族,具有與蛋白二硫鍵異構(gòu)酶(protein disulfideisomerase,PDI)結(jié)構(gòu)域高度類似的序列以及生物學(xué)活性。我們實(shí)驗(yàn)室利用蛋白質(zhì)組學(xué)的方法發(fā)現(xiàn)RA患者的滑膜組織以及滑液特異性高表達(dá)TXNDC5。研究表明在低氧狀態(tài)下,TXNDC5在內(nèi)皮細(xì)胞中可輔助內(nèi)皮抑素-1、腎上腺髓質(zhì)素等的折疊或分泌,推測TXNDC5可能通過行使PDI的功能參與RA的病理進(jìn)程。盡管大量證據(jù)表明雌激素與RA存在相關(guān)性,但具體的

4、病理機(jī)制還不清楚。雌激素是否通過上調(diào)PADI4的表達(dá)參與RA病理過程還有待于證實(shí)。TXNDC5的表達(dá)除受低氧調(diào)節(jié)外,是否還受雌激素的調(diào)節(jié)也不清楚。
　　 目的：以膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎(CIA)為RA模型,向動(dòng)物注射雌激素,研究關(guān)節(jié)炎的病理變化和PADI4及TXNDC5在滑膜中的表達(dá)狀況,進(jìn)而探討雌激素對RA發(fā)病過程的影響及其可能的病理機(jī)制。
　　 方法：向雄性Lewis大鼠(n=16)尾根部皮下免疫Ⅱ型膠原(CⅡ,800μg/

5、只),建立CIA模型。在CⅡ初次免疫后的第2、5、8、11、14、17、20、23天皮下注射17β-雌二醇(80μg/只)。分別于第0、28和35天收集血液,同時(shí)于第35天處死動(dòng)物并收集滑膜。ELISA檢測血清中TNFα、IL-1β和VEGF的含量;免疫組化、Western-Blot和real-time PCR.檢測滑膜中PADI4和TXNDC5表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：⑴與只注射CⅡ相比,雌激素明顯延緩CIA發(fā)病時(shí)間約6天(P=

6、0.045),但對炎癥程度及發(fā)病率沒有顯著影響；⑵與只注射CⅡ相比,血液中FNFα、IL-1β的含量沒有顯著改變,但是VEGF含量明顯升高(P=0.023)；⑶免疫組織化學(xué)顯示,PADI4主要表達(dá)于滑膜襯里及侵潤的炎性細(xì)胞中,TXNDC5主要表達(dá)于滑膜襯里以及毛細(xì)血管的內(nèi)皮細(xì)胞。雌激素干預(yù)下的CIA滑膜組織異常增殖并伴有毛細(xì)血管增生；⑷雌激素明顯上調(diào)CIA滑膜中FXNDC5的表達(dá)水平(P＜0.05),但PADI4表達(dá)水平無明顯變化。