骨髓增生異常綜合征的MIC實驗診斷研究.pdf

1、目的：
　　骨髓增生異常綜合征（MDS）是一組獲得性造血干細胞克隆性疾病，主要表現(xiàn)為無效造血、病態(tài)造血和易進展為急性白血病。目前MDS發(fā)病率在我國約為4/10萬人口，并呈逐年增高傾向，已成為嚴重危害中老年人健康的惡性造血系統(tǒng)腫瘤。因為MDS極大的異質(zhì)性，其診斷尚未有一致性的金標準，所以MDS的診斷迄今為止仍是血液病診斷的重點和難點。本研究探討了細胞形態(tài)學(xué)檢查、流式細胞免疫分型、細胞遺傳學(xué)(Morphology、Flow Cytom

2、etric Immunophenotype、Cytogenetics,MIC)在MDS診斷中的作用，以期望減少MDS的誤診和漏診，為臨床提供診斷依據(jù)。
　　方法：
　　以2006年維也納最低診斷標準及2008年WHO的骨髓增生異常綜合征診斷分型標準為主要參考，對41例確診的MDS患者和18例疑似MDS患者的骨髓細胞涂片，骨髓病理學(xué)檢查，細胞遺傳學(xué)及細胞流式免疫分型的特點進行回顧性研究。選擇同期就診的30例再生障礙性貧血患者（

3、AA）作為對照組。用SPSS17.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。
　　結(jié)果：
　　1臨床資料
　　59例患者中，35例患者有頭暈、乏力、面色蒼白；24例伴有發(fā)熱；6例有出血現(xiàn)象；6例肝脾腫大；1例淋巴結(jié)腫大。
　　2細胞形態(tài)學(xué)檢查
　　2.1血常規(guī)
　　59例患者中，紅細胞平均數(shù)為2.13×1012/L；白細胞平均數(shù)2.74×109/L；血紅蛋白平均數(shù)82g/L；血小板平均數(shù)91×109/L；平均紅細

4、胞體積（MCV）100.6fl。網(wǎng)織紅細胞百分比平均數(shù)為0.5％。單系血細胞減少患者2例，兩系血細胞減少患者14例，全血細胞減少患者43例。油鏡分類計數(shù)200個白細胞，59例患者中，原始細胞百分比平均數(shù)為2.7%，35例患者檢測到幼稚粒細胞，其中出現(xiàn)原始粒細胞、早幼粒細胞、中幼粒細胞及晚幼粒細胞的病例數(shù)分別為23（65.7%）例、1（2.9%）例、10（28.6%）例、1（2.9%）例。相應(yīng)各階段幼稚粒細胞所占數(shù)值范圍分別為（0～15個

5、）、（0～1個）、（0～18個）、（0～24個）。23例成熟粒細胞胞質(zhì)顆粒減少，21例假Pelger-Huet畸形。13例患者外周血檢測到有核紅細胞，數(shù)值范圍為（0～18個）。27例成熟紅細胞出現(xiàn)明顯的異形性，可見靶形、橢圓形、淚滴形以及巨型紅細胞。未見巨核細胞，17例可見巨大血小板。
　　2.2骨髓涂片檢查
　　59例患者中，骨髓增生活躍或明顯活躍者55例，4例增生減低。紅系病態(tài)造血比例占66.1%。12例幼紅細胞出現(xiàn)胞質(zhì)

6、空泡。39例幼紅細胞出現(xiàn)雙核，7例幼紅細胞出現(xiàn)三核，3例出現(xiàn)花瓣核、不規(guī)則核。粒系病態(tài)造血的比例占40.7%。17例患者早期階段粒細胞顆粒明顯減少或缺如，6例胞漿內(nèi)顆粒明顯增多。24例觀察到假Pelger-Huet畸形，2例分葉過多。3例出現(xiàn)Auer小體。巨核系病態(tài)造血比例為20.3%。10例為低分葉的小巨核、單圓核巨核和淋巴樣巨核。2例患者出現(xiàn)多圓核巨核細胞。18例患者糖原染色幼紅細胞陽性。27例鐵染色外鐵陽性（++～+++），23例

7、內(nèi)鐵升高，出現(xiàn)環(huán)鐵的患者共8例，并且各亞型均有出現(xiàn)。
　　3骨髓病理檢查
　　所有患者中，骨髓病理檢查顯示細胞增生程度為活躍或明顯活躍的共46例。2例網(wǎng)硬蛋白增多。17例小血管增生明顯。8例出現(xiàn)幼稚前體細胞異常定位（ALIP）。15例CD34+細胞增多。32例檢測到微巨核細胞。
　　4常規(guī)染色體核型分析
　　所有59例患者染色體檢查結(jié)果顯示核型異常者25例，其中復(fù)雜染色體核型異常占36.0%，亞型分布為RCUD1

8、例，MDS-RCMD4例，MDS-RAEB-I3例，MDS-RAEB-Ⅱ1例。簡單染色體核型異常的亞型分布以MDS-RCMD為主。8號染色體異常2例。-5、5q-各2例，-7、7q-各2例，20q-1例。
　　5 FCM分析
　　5.1髓系前體細胞免疫表型異常
　　應(yīng)用CD34、CD117、HLA-DR、CD11b、CD15單克隆抗體組合分析MDS患者髓系前體細胞免疫表型。MDS組檢測到CD34+原始細胞免疫表型的異常

9、分別為：23例原始細胞比例增高，呈聚集性分布；11例CD45表達減低；7例表達粒細胞成熟階段抗原CD11b、CD15；12例表達淋巴細胞相關(guān)抗原。
　　5.2粒細胞免疫表型異常
　　選擇CDl3/CDl6及CD11b/CDl6單克隆抗體組合檢測分析粒細胞分化成熟期間出現(xiàn)的免疫表型異常。MDS患者39例SSC減低；34例CD13/CD16、CD11b/CD16關(guān)系模式異常；28例CD56陽性表達；未檢測到淋巴系相關(guān)抗原異常表達

10、。
　　5.3單核細胞免疫表型異常
　　59例MDS患者中，12例出現(xiàn)CD56異常表達；5例異常表達CD34；11例CD33表達減少；19例CD14表達減低；1例表達淋巴系相關(guān)抗原。
　　5.4紅細胞免疫表型異常
　　采用 CD71、GlyA單克隆抗體組合檢測紅細胞群。MDS患者中28例CD45表達減弱；10例CD71表達異常；9例GlyA表達異常；1例異常表達CD117。
　　結(jié)論：
　　細胞形態(tài)學(xué)

11、、細胞遺傳學(xué)、骨髓病理學(xué)和細胞流式免疫分型對骨髓增生異常綜合征的診斷均具有重要意義，但其對 MDS的診斷又各具特點,各有側(cè)重，相互補充。細胞形態(tài)學(xué)是MDS診斷和分型的關(guān)鍵和基礎(chǔ)。常規(guī)染色體核型檢查在MDS患者特別是疑似MDS患者的初診及隨訪診斷中起著重要作用。骨髓活檢對于評價骨髓組織結(jié)構(gòu)、骨髓增生程度、網(wǎng)狀纖維增生和巨核細胞的病態(tài)造血改變發(fā)揮獨特作用。流式細胞免疫分型對于評估造血細胞的異常具有靈敏度高，重復(fù)性好的特點，而且較少受到標本質(zhì)