間歇性低壓低氧處理降低大鼠右心室乳頭肌對異丙腎上腺素的反應(yīng).pdf

1、目的：近年來，大量研究表明間歇性低壓低氧(intermittent hypobaric hypoxia，IHH)處理具有明顯的心臟保護(hù)作用，并越來越受到人們的重視和關(guān)注，已成為臨床醫(yī)學(xué)、高原醫(yī)學(xué)和運(yùn)動醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)之一。眾多研究顯示，IHH處理顯著提高心肌抗缺血/再灌注、缺氧/復(fù)氧損傷的能力，表現(xiàn)為顯著減輕缺血再灌注后心臟舒縮功能降低，縮小冠脈閉塞所致心肌梗死面積，以及抗缺血再灌注心律失常作用。目前已知IHH心臟保護(hù)作用主要涉及以下幾方

2、面，如IHH可以改善心肌物質(zhì)與能量代謝的能力，增加氧的有效利用、減少ATP耗竭，增加心肌毛細(xì)血管密度、改善心肌供血，增強(qiáng)心肌抗氧化酶活性，增加心肌對氧自由基的抵抗力：開放K<,ATP>通道，尤其是線粒體上的K<,ATP>通道；減弱缺血/再灌注時(shí)肌漿網(wǎng)的損傷，維持Na<'+>/Ca<'2+>孫交換體(NCX)的活性，減少鈣超載；抑制線粒體通透轉(zhuǎn)換孔的開放；上調(diào)心肌iNOS的mRNA和蛋白的水平，導(dǎo)致NO的生成增多；抑制心肌細(xì)胞的凋亡等等。

3、但有關(guān)IHH心臟保護(hù)作用的確切機(jī)制遠(yuǎn)未闡明。心臟β腎上腺素能受體在正常心臟活動調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用，其功能下調(diào)或受體阻斷可表現(xiàn)某種心臟保護(hù)作用。有報(bào)道IHH可減輕心肌缺血期鈣超載程度，其機(jī)理可能與α<,1B>腎上腺素能受體亞型有關(guān)IHH對心臟β腎上腺素能受體影響如何，或心臟β腎上腺素能受體是否參與IHH心臟保護(hù)作用未見報(bào)道。本研究應(yīng)用經(jīng)典的細(xì)胞內(nèi)微電極記錄技術(shù)及肌肉收縮描記方法，觀察β腎上腺素能受體激動劑一異丙腎上腺素(ISO)對IHH處

4、理14天、28天和42天大鼠右心室乳頭肌動作電位和機(jī)械收縮的影響，以探討IHH對大鼠心肌β腎上腺素能受體的影響。 方法：雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠，以戊巴比妥鈉(30-35mg/kg，i．p．)腹腔注射麻醉，仰位固定，開胸迅速取出心臟，置于冷凍(0-4℃)改良臺氏液中以制備右室乳頭肌標(biāo)本。制備好的乳頭肌腱膜端固定于張力換能器，另一端用不銹鋼針固定于灌流槽的硅橡膠上。用改良臺氏液(pH 7.4±0.05)以12m

5、l/min的速度灌流標(biāo)本，溫度維持在37℃，并持續(xù)充以純氧。標(biāo)本在灌流液中平衡一小時(shí)后開始實(shí)驗(yàn)。以刺激頻率為1HZ，波寬3ms，強(qiáng)度為2倍閾強(qiáng)度的矩形脈沖刺激標(biāo)本，誘發(fā)乳頭肌動作電位和收縮。用尖端電阻10～20兆歐的玻璃微電極緩慢插入乳頭肌細(xì)胞內(nèi)，記錄細(xì)胞內(nèi)動作電位。電活動經(jīng)微電極放大器、高速數(shù)模轉(zhuǎn)換器儲存于計(jì)算機(jī)，通過我室自編的程序進(jìn)行自動采集、分析。動作電位參數(shù)包括靜息電位(RP)、動作電位(OS)、動作電位幅值(APA)、動作電位

6、0相最大上升速率(V<,max>)、復(fù)極化50％(APD<,50>)和90％的時(shí)間(APD<,90>)。機(jī)械收縮通過壓力換能器儲存于計(jì)算機(jī)，肌肉收縮參數(shù)包括最大收縮張力(P<,max>)和最大張力上升速度(P<,dT/dt>)。用累加給藥法觀察不同濃度異丙腎上腺素(工S0，10<'-8>，10<'-7>，10<'-6>mol/L)對大鼠右心室乳頭肌動作電位和機(jī)械收縮的影響。 結(jié)果：(1)IHH明顯延長大鼠右心室乳頭肌動作電位時(shí)程

7、：APD<,50>由對照組的23.2±5.5 ms分別延長為35.0± 7.6 ms、31.7±6.0 ms、48.3±3.4 ms；.APD90由對照組的72.5±9.8 ms分別延長為100.2±5.9 ms、99.2±9.0 ms、133.8±21.2 ms；(2)ISO濃度依賴性地增加各組動物右心室乳頭肌動作電位幅值(APA)、動作電位超射(OS)、動作電位0期最大上升速率(V<,max>)，延長動作電位復(fù)極化50％(A