類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎B淋巴細(xì)胞刺激因子及CD19CD25B細(xì)胞亞群的研究.pdf

1、目的：類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種以慢性多關(guān)節(jié)滑膜炎癥為主要特征的全身性自身免疫性疾病。RA的病因和發(fā)病機(jī)制還不十分清楚，目前認(rèn)為感染因素、遺傳因素、T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、滑膜細(xì)胞均參與了類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)病。已有多種動(dòng)物模型證明B淋巴細(xì)胞在自身免疫性關(guān)節(jié)炎中起了關(guān)鍵的作用，尤其是利妥昔單抗的研發(fā)使難治性RA患者的病情得到了明顯的改善，越來越多的證據(jù)表明B細(xì)胞在RA的發(fā)病機(jī)制中起著重要作用。近年來

2、研究表明B淋巴細(xì)胞刺激因子（B lymphocyte stimulator，BlyS）作為一種B淋巴細(xì)胞共刺激因子，參與了B細(xì)胞的增殖和分化，在體液免疫中亦具有重要的作用，其過量表達(dá)可引起自身免疫性疾病，特別是與RA、系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）、干燥綜合征（sjogren’s syndrome，SS）發(fā)病關(guān)系密切。近年的臨床研究表明，CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）可能與

3、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，然而，對(duì)于Freg在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)制中作用的認(rèn)識(shí)尚不一致，有少數(shù)學(xué)者認(rèn)為RA患者外周血表達(dá)CD25的B淋巴細(xì)胞明顯增多，在RA發(fā)病機(jī)制中起著重要作用，但這方面的報(bào)道較少。本實(shí)驗(yàn)通過檢測(cè)RA患者血清及關(guān)節(jié)液中B淋巴細(xì)胞刺激因子的水平及外周血CD19CD25B淋巴細(xì)胞的表達(dá)，分析其臨床意義，以進(jìn)一步了解RA的發(fā)病機(jī)制，為RA的治療提供新的理論依據(jù)。
　　 方法：選取初治RA患者24例，既往均不曾應(yīng)用

4、甲氨蝶呤（MTX）、柳氮磺吡啶（SASP）等慢作用抗風(fēng)濕藥及生物制劑。RA患者均符合1987年美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)（ARA）類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎診斷標(biāo)準(zhǔn)；并取20名健康查體者為對(duì)照組。記錄RA患者的類風(fēng)濕因子（RF）、免疫五項(xiàng)、血沉（ESR）、C-反應(yīng)蛋白（CRP）、血小板計(jì)數(shù)（PLT）及病程、首發(fā)癥狀。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ABC-ELISA）檢測(cè)RA組和健康對(duì)照組的血清及RA組的關(guān)節(jié)液中BlvS的水平。以流式細(xì)胞儀（FCM）檢測(cè)RA患者和

5、健康對(duì)照外周血CD19和CD25的表達(dá)。RA患者血清及關(guān)節(jié)液BlyS水平及CD19、CD25百分比與RF、ESR、CRP、PLT進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　 采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理。所有計(jì)量資料數(shù)均以（x±s）表示，兩組間比較采用兩樣本均數(shù)比較的t檢驗(yàn)，相關(guān)性檢驗(yàn)采用直線相關(guān)，P<0.05，則認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：1.一般資料的描述：RA血清及關(guān)節(jié)液標(biāo)本24份，其中女性18例，男性6例，年齡

6、（51.2±15.9）歲；病程（20.1±15.6）月。正常健康對(duì)照組20名，其中女性15例，男性5例，年齡（40.2±15.7）歲。兩組在性別和年齡構(gòu)成上差異無顯著性。
　　 2.RA患者血清BlyS水平為（0.390±0.278）ng/ml，較正常對(duì)照組（0.125±0.035）ng/ml明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。
　　 3.RA患者關(guān)節(jié)液組BlyS含量（0.681±0.335）ng/ml明顯高于

7、RA患者血清BlyS含量（0.390±0.278）ng/ml，兩者具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　 4.RA患者血清中BlyS水平與RF具有顯著相關(guān)性（r=0.710P<0.01）；RA患者血清中BlyS水平與ESR成顯著正相關(guān)（r=0.541 P<0.01）；RA患者血清中BlyS水平與CRP成顯著正相關(guān)（r=0.681 P<0.01）；RA患者血清中B1yS水平與PLT成顯著正相關(guān)（r=0.603 P<0.01）。

8、r>　　 5.RA患者外周血中CD25+淋巴細(xì)胞百分?jǐn)?shù)為（8.814±2.034）％顯著高于正常對(duì)照組（3.233±0.800）％差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；CD19+淋巴細(xì)胞百分?jǐn)?shù)為（10.236±2.212、）％高于正常對(duì)照組（6.870±1.052）％；差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；CD19+CD25+（0.500±0.259）％較正常對(duì)照組（0.168±0.482）％高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

9、>　　 結(jié)論：1.RA患者血清及關(guān)節(jié)液中B淋巴細(xì)胞刺激因子明顯增高，說明BlyS在RA的發(fā)病過程起一定作用。
　　 2.RA患者關(guān)節(jié)液中存在高水平的BlvS，且高于血清水平，說明BlyS在引起關(guān)節(jié)局部炎癥過程起重要作用，與RA的關(guān)節(jié)滑膜病變和骨質(zhì)破壞發(fā)生密切相關(guān)。
　　 3.RA患者血清中BlyS水平明顯升高，并與RF、ESR、CRP、PLT呈正相關(guān)，說明BlyS與RA的病情活動(dòng)關(guān)系密切，可為RA的病情監(jiān)測(cè)提供一定的參