NudC及信號(hào)分子MEKK3和JNK對(duì)腎癌細(xì)胞遷移能力的影響.pdf

1、研究目的：
　　 (1)比較人胚腎細(xì)胞株293和腎癌細(xì)胞株OS-RC-2細(xì)胞遷移能力的差異。
　　 (2)檢測(cè)上述細(xì)胞株中核遷移蛋白NudC(NucleardistributiongeneC的表達(dá)產(chǎn)物)、有絲分裂原活化蛋白激酶激酶激酶3(mitogen-activatedproteinkinasekinasekinase3,MEKK3)和c-Jun氨基末端激酶(c-JunNH2-terminalkinases,JNK)等

2、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子的表達(dá)和活性,分析它們與腎癌細(xì)胞遷移活性的關(guān)系。
　　 研究方法：
　　 (1)采用Transwell方法比較293和OS-RC-2兩個(gè)細(xì)胞株的遷移能力。
　　 (2)采用RT-PCR方法檢測(cè)MEKK3和NudCmRNA在胚腎細(xì)胞株293和腎癌細(xì)胞株OS-RC-2中的表達(dá)。
　　 (3)采用Westernblotting方法檢測(cè)NudC、MEKK3、和JNK蛋白在293和OS-RC-2細(xì)胞株中

3、的表達(dá),p-MEKK3和p-JNK在兩個(gè)細(xì)胞株的水平,以及兩個(gè)細(xì)胞株的細(xì)胞核內(nèi)NudC的表達(dá)差異。
　　 (4)采用免疫熒光方法檢測(cè)NudC在293和OS-RC-2細(xì)胞株的定位。
　　 研究結(jié)果：
　　 (1)細(xì)胞遷移結(jié)果顯示,腎癌細(xì)胞株OS-RC-2的遷移能力明顯高于胚腎細(xì)胞株293。
　　 (2)在mRNA水平,人腎癌細(xì)胞株OS-RC-2中MEKK3和NudC表達(dá)均明顯高于人胚腎細(xì)胞株293。

4、　　 (3)在蛋白水平,人腎癌細(xì)胞株OS-RC-2中MEKK3和JNK的磷酸化水平均高于人胚腎細(xì)胞株293。
　　 (4)免疫熒光結(jié)果和細(xì)胞核蛋白表達(dá)結(jié)果顯示NudC在人腎癌細(xì)胞株OS-RC-2的核內(nèi)表達(dá)明顯高于人胚腎細(xì)胞株293。
　　 結(jié)論：
　　 MEKK3和JNK的磷酸化水平在腎癌細(xì)胞株OS-RC-2含量增加,NudC在腎癌細(xì)胞株核內(nèi)的表達(dá)明顯高于正常細(xì)胞株,提示NudC以及信號(hào)相關(guān)分子MEKK3、JN