扇貝多肽對單次UVA氧化損傷人HaCaT角質形成細胞和無毛小鼠皮膚的保護作用機制.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的 探討在單次長波紫外線(UVA)輻射下,扇貝多肽(PCF)對人HaCaT角質形成細胞和昆明種無毛小鼠皮膚氧化損傷的保護作用機制.方法采用海洋生物工程技術,從櫛孔扇貝中提取PCF,Mr=879.建立UVA氧化損傷細胞和無毛小鼠的病理模型,輻射強度分別為:細胞5J/cm<'2>;無毛小鼠4.13J/cm<'2>.細胞實驗設計分為7組:對照組,UVA模型組,UVA+0.125％PCF組,UVA+0.25%PCF組,UVA+0.5%PCF組

2、,UVA+1%PCF組,和UVA+0.1%VitC組.MTT法檢測細胞活性;酶生化法測定胞漿超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-px)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量以及細胞抗超氧陰離子能力(A-SAC)、總抗氧化能力(T-AOC);流式細胞儀PI染色法測定細胞的凋亡率;Fluo-3-AM為熒光染料測定細胞內(nèi)游離[Ca<'2+>]<,i>;Rhodamine 123為熒光染料測定線粒體膜電位(△ψM);透射電鏡

3、觀察細胞超微結構的改變;彗星電泳法檢測DNA的損傷程度;原位雜交技術檢測細胞內(nèi)p21mRNA的變化.動物實驗設計分為5組:對照組,UVA模型組,UVA+5%PCF組,UVA+20%PCF組,UVA+10%Vit C組.免疫組化法測定皮膚p53基因蛋白表達、表皮生長因子受體(EGFR)表達、P物質、Ⅰ型膠原及Ⅳ型膠原的含量.結論扇貝多肽對單次UVA(5J/cm<'2>)誘導的人HaCaT角質形成細胞氧化損傷有保護作用.其機制與清除氧自由基

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