應用合成致死原理篩選胰腺癌對化療藥物反應的關鍵基因.pdf

1、目的：本研究的目的在于應用全基因組范圍內合成致死篩選的方法，尋找胰腺癌對化療藥物耐藥中的關鍵基因，以期為胰腺癌的診斷和治療提供新的生物標記物、治療靶點和聯(lián)合治療方案。
　　 方法：通過分子克隆的途徑構建以piggy Bac轉座子為基礎的全基因組搜尋載體；確定人胰腺癌細胞系(Panc-1)的特性；通過DNA轉染和以熒光素酶為基礎的報告基因檢測建立并篩選含有穩(wěn)定四環(huán)素介導的基因調控系統(tǒng)的Panc-1細胞株；利用大規(guī)模電穿孔轉染和pi

2、ggyBac介導的基因重組建立Panc-1細胞株的全基因組范圍那突變文庫；并進一步進行了與吉西他濱合成致死的預篩選。
　　 結果：成功構建了以piggyBac轉座子為基礎的基因搜尋載體；篩選得到了2個具有穩(wěn)定四環(huán)素基因表達調控系統(tǒng)的Panc-1細胞株，即Panc-1-9.3和Panc-1-1781細胞株；成功建立了Panc-1細胞全基因組范圍內的隨機基因突變文庫，進一步將進行吉西他濱合成致死的篩選。
　　 結論：成功構建