體外灌注同位素188Re標(biāo)記的抗MHC-Ⅱ單克隆抗體對肝移植后早期急性排斥反應(yīng)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景與目的： 急性移植排斥反應(yīng)是自器官移植開展以來就一直困擾醫(yī)學(xué)界的重大難題。現(xiàn)階段預(yù)防和治療急性排斥反應(yīng)的方法主要是移植術(shù)后使用免疫抑制劑，但其存在需長期給藥、造成患者免疫功能低下，發(fā)生感染或腫瘤的幾率大大增加、價格昂貴等不利因素；除此之外，還有細(xì)胞或組織的微囊化移植、術(shù)前供體細(xì)胞的輸注、各種抗體的應(yīng)用等方法，但其臨床應(yīng)用的效果卻比較甚微。如何找到一條新的途徑在降低急性排斥反應(yīng)發(fā)生的同時盡量減少免疫抑制劑的使用時間和使用劑量已

2、成為研究的關(guān)鍵之一。本研究通過將生物學(xué)和核醫(yī)學(xué)兩種手段結(jié)合起來，建立豬肝移植供肝體外灌注模型，觀察同位素標(biāo)記的抗MHC Ⅱ抗體對于肝移植后早期急性排斥反應(yīng)的作用和影響，探尋其作用的機(jī)理，為臨床實(shí)際應(yīng)用提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法： 將實(shí)驗(yàn)豬分為3組行原位肝移植術(shù)，供肝體外分別行生理鹽水(第1組)、抗MHC Ⅱ抗體2E9/13F(ab’)2片段(第2組)和同位素188Re標(biāo)記的2E9/13F(ab’)2灌注處理(第3組)，檢

3、測各組術(shù)后生存時間、移植肝功能、血清細(xì)胞因子變化及行病理組織學(xué)檢查。建立體外混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)模型，觀察經(jīng)上述試劑處理后的淋巴細(xì)胞的增殖和活化情況，測定相關(guān)細(xì)胞因子mRNA的水平，比較體內(nèi)和體外環(huán)境下的異同并分析其原因。 結(jié)果： 3組生存時間明顯比第2組和第1組高(2周生存率分別為100％、83.3％、50％；1月生存率分別為66.7％、50％、0％；2月生存率分別為50％、16.7％、0％)。第1組血清總膽紅素(7.87

4、±1.10 vs 4.88±0.56 vs 4.41±0.76 mg/dl；p<0.05)、血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(58±7.58 vs 41.25±4.06 vs 38.25±8.46 IU/L；p<0.05)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(1499.75±437.50 vs 675±432.14 vs 825.5±344.04 IU/L；p<0.05)在術(shù)后第7天的水平明顯高于第2和第3組。然而，第2組的上述指標(biāo)平均值在術(shù)后第13天和第14天明顯高于第3組，

5、包括血清總膽紅素(4.00+0.24 vs 1.92±0.75，4.26±0.58 vs 1.82±0.65 mg/dl；P<0.05)，谷草轉(zhuǎn)氨酶(600.75±164.16 vs 243.5±162.32，718±273.54 vs 223±147.67 IU/L；P<0.05)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(40.75±3.18 vs 28.75±5.22，42.5±4.53 vs 30.25±3.49 IU/L；P<0.05)。第1組術(shù)后第4天的

6、IL-2平均值(462.55±117.39 vs 70.3±14.57 vs 88.7±18.67 pg/ml；P<0.05)明顯高于同期的第2組和第3組數(shù)值；而第1組和2組術(shù)后6天的IFN-r(2479.85±573.62 vs1759.2±255.55 vs139.56±46.37 pg/ml；P<0.05)、IL-10(1975.00±511.67 vs 2143.25±507.49 vs750.27±199.44 pg/ml；P

7、<0.05)、TNF-α(107.15+29.74 vs 85.04±10.35 vs7.40±2.04 ng/ml；P<0.05)平均值也是明顯高于同時間的第3組數(shù)值。體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)第3組的淋巴細(xì)胞增殖率，IL-2 IFN-r、TNF-a的mRNA量明顯小于第1和第2組。IL-10mRNA量各組間沒有明顯差異。 結(jié)論： 同位素188Re標(biāo)記的2E9/13F(ab’)2灌注處理供肝后能有效抑制肝臟早期急性免疫排斥反應(yīng)的發(fā)生