IL-18Ab拮抗BCG+LPS誘導(dǎo)的小鼠急性免疫性肝壞死的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、病毒性肝炎的發(fā)病機(jī)理與免疫功能紊亂有關(guān),從目前資料來(lái)看,它與Th1細(xì)胞因子介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用密切相關(guān),常與一系列細(xì)胞因子組成的反應(yīng)鏈有關(guān),其中IL-18是最矚目的一種,由這種前衛(wèi)因子誘發(fā)的一系列細(xì)胞因子級(jí)聯(lián)反應(yīng),導(dǎo)致組織凋亡、炎癥、壞死,因此造成嚴(yán)重肝組織嚴(yán)重?fù)p傷,甚至導(dǎo)致肝功能衰竭,危及生命.在小鼠IL-18人工合成的基礎(chǔ)上,實(shí)驗(yàn)又分成二個(gè)步驟:首先用小鼠IL-18(10ug/次/只)分別與等體積福氏完全或不完全佐劑混合,按免疫程序制

2、備小鼠抗IL-18抗血清,用ELISA法檢測(cè)血清抗體效價(jià),抗體效價(jià)為等體積50％抑制的IL-18濃度為400pg/ml.第二步,在拮抗小鼠免疫性肝壞死實(shí)驗(yàn)中,每只小鼠腹腔注射卡介苗(BCG)100mg/kg,十天后再腹腔注射內(nèi)毒素(LPS)1mg/kg來(lái)誘導(dǎo)小鼠的急性免疫性肝壞死,在設(shè)立BCG免疫激活對(duì)照組的基礎(chǔ)上,按注射LPS前半小時(shí)的處理?xiàng)l件不同,即是否施予抗IL-18血清(0.2ml/只),設(shè)立抗IL-18抗體治療組、模型組,注射

3、小劑量LPS(1mg/kg)24小時(shí)后觀察各組小鼠肝組織的病理改變,并測(cè)定其血清IL-18的水平及肝組織表達(dá)的IL-18、IFN-γ、TNF-α mRNA的水平的差異.結(jié)果顯示:在模型組中,小鼠肝組織病變明顯,可見(jiàn)大片肝臟組織壞死,其炎癥活動(dòng)度計(jì)分顯著高于治療組及對(duì)照組(P<0.01),其血清IL-18的水平及肝組織表達(dá)的IL-18、IFN-γ、TNF-α mRNA的水平也明顯高于其它兩組(P<0.01).通過(guò)相關(guān)分析發(fā)現(xiàn),肝組織的炎癥