青蒿琥酯抑制Con A誘導小鼠免疫性肝損傷的作用機制研究.pdf

1、青蒿素及其衍生物除具有顯著抗瘧作用外，其抗炎和免疫調(diào)節(jié)作用在類風濕性關節(jié)炎和系統(tǒng)性紅斑狼瘡等模型中得到證實。為挖掘其新適應癥，本試驗采用最接近乙型肝炎發(fā)病機制及病理變化的動物模型---Con A誘導小鼠免疫性肝損傷為研究對象，利用青蒿琥酯(artesunate，Art)對其進行干預，來觀察研究小鼠組織病理損傷、血清轉氨酶水平、相關細胞因子表達量和信號通路相關蛋白表達水平，綜合分析，探討Art對Con A肝損傷模型的作用及其相關機制。具體

2、研究方法及相關結果如下:
　　為探討Art對Con A免疫性肝損傷的作用，我們首先使用不同劑量Art灌胃小鼠以確定藥物的安全濃度。預試驗結果顯示所用Art劑量（27、54、108 mg/kg）對小鼠無明顯毒副作用。在此基礎上將小鼠隨機分組為空白對照組、模型組、Art(27、54、108 mg/kg)處理組，連續(xù)用藥7d后以Con A（18 mg/kg）尾靜脈注射造模，造模后8h計算小鼠肝臟指數(shù)、肝組織病理變化和血清轉氨酶情況。結果

3、表明:與模型組比較，Art高劑量組的肝臟指數(shù)、血清轉氨酶水平顯著下降(P＜0.01)，H.E.染色可見肝組織損傷明顯減輕。
　　為研究Art發(fā)揮保護作用的潛在機制，在上述試驗分組及造模的基礎上采集小鼠肝組織，提取蛋白，運用ELISA和western-blot技術分別檢測炎性細胞因子和NF-κB、MAPKs信號通路中相關蛋白的表達水平。結果表明，與模型組比較，Art可以顯著降低IL-1β、IL-6、IL-17、TNF-α、IFN-γ

4、髓過氧化物酶(MPO)和同型半胱氨酸(Hcy)的水平，同時升高IL-10的表達量。在蛋白表達方面，與模型組相比，Art高劑量組可以明顯下調(diào)p-p65和p-Iκ Bα的表達水平，顯著抑制Jnk、Erk1/2和p38的磷酸化水平(P＜0.01);中劑量組對以上指標也有較好地抑制作用，低劑量組作用不明顯。為進一步探討Art緩解肝損傷作用與NF-κB信號通路之間的關系，在造模前使用NF-κB特異阻斷劑PDTC和Art干預7d后，采集組織樣本進行