青蒿琥酯抑制Con A誘導(dǎo)小鼠免疫性肝損傷的作用機(jī)制研究.pdf

1、青蒿素及其衍生物除具有顯著抗瘧作用外，其抗炎和免疫調(diào)節(jié)作用在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和系統(tǒng)性紅斑狼瘡等模型中得到證實(shí)。為挖掘其新適應(yīng)癥，本試驗(yàn)采用最接近乙型肝炎發(fā)病機(jī)制及病理變化的動(dòng)物模型---Con A誘導(dǎo)小鼠免疫性肝損傷為研究對(duì)象，利用青蒿琥酯(artesunate，Art)對(duì)其進(jìn)行干預(yù)，來(lái)觀察研究小鼠組織病理?yè)p傷、血清轉(zhuǎn)氨酶水平、相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)量和信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平，綜合分析，探討Art對(duì)Con A肝損傷模型的作用及其相關(guān)機(jī)制。具體

2、研究方法及相關(guān)結(jié)果如下:
　　為探討Art對(duì)Con A免疫性肝損傷的作用，我們首先使用不同劑量Art灌胃小鼠以確定藥物的安全濃度。預(yù)試驗(yàn)結(jié)果顯示所用Art劑量（27、54、108 mg/kg）對(duì)小鼠無(wú)明顯毒副作用。在此基礎(chǔ)上將小鼠隨機(jī)分組為空白對(duì)照組、模型組、Art(27、54、108 mg/kg)處理組，連續(xù)用藥7d后以Con A（18 mg/kg）尾靜脈注射造模，造模后8h計(jì)算小鼠肝臟指數(shù)、肝組織病理變化和血清轉(zhuǎn)氨酶情況。結(jié)果

3、表明:與模型組比較，Art高劑量組的肝臟指數(shù)、血清轉(zhuǎn)氨酶水平顯著下降(P＜0.01)，H.E.染色可見(jiàn)肝組織損傷明顯減輕。
　　為研究Art發(fā)揮保護(hù)作用的潛在機(jī)制，在上述試驗(yàn)分組及造模的基礎(chǔ)上采集小鼠肝組織，提取蛋白，運(yùn)用ELISA和western-blot技術(shù)分別檢測(cè)炎性細(xì)胞因子和NF-κB、MAPKs信號(hào)通路中相關(guān)蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果表明，與模型組比較，Art可以顯著降低IL-1β、IL-6、IL-17、TNF-α、IFN-γ

4、髓過(guò)氧化物酶(MPO)和同型半胱氨酸(Hcy)的水平，同時(shí)升高IL-10的表達(dá)量。在蛋白表達(dá)方面，與模型組相比，Art高劑量組可以明顯下調(diào)p-p65和p-Iκ Bα的表達(dá)水平，顯著抑制Jnk、Erk1/2和p38的磷酸化水平(P＜0.01);中劑量組對(duì)以上指標(biāo)也有較好地抑制作用，低劑量組作用不明顯。為進(jìn)一步探討Art緩解肝損傷作用與NF-κB信號(hào)通路之間的關(guān)系，在造模前使用NF-κB特異阻斷劑PDTC和Art干預(yù)7d后，采集組織樣本進(jìn)行