溫莪術(shù)蛋白及葉片蛋白雙向電泳技術(shù)體系的初步研究.pdf

1、溫郁金是有著千年栽培歷史的浙江省地道中藥材，主產(chǎn)于浙江省溫州市瑞安一帶。溫郁金屬姜科姜黃屬，其地下塊莖俗稱(chēng)莪術(shù)。研究證明：莪術(shù)油具有抗腫瘤、抗病毒細(xì)菌、抗凝血和保肝等多種作用。目前對(duì)莪術(shù)的研究主要是對(duì)其活性成分的化學(xué)成分分析、藥理活性及其在臨床上的應(yīng)用，對(duì)植株的生理生態(tài)的研究尤其是生物學(xué)研究卻鮮有報(bào)道。 人類(lèi)基因組計(jì)劃的完成標(biāo)志著生命科學(xué)已進(jìn)入后基因組時(shí)代，蛋白質(zhì)組學(xué)的研究被提升到了前所未有的高度。蛋白質(zhì)組的主要研究?jī)?nèi)容是通過(guò)其

2、三大核心技術(shù)一雙向電泳、生物質(zhì)譜、生物信息學(xué)技術(shù)對(duì)全套蛋白質(zhì)進(jìn)行動(dòng)態(tài)的探索，達(dá)到闡述生物體全部蛋白質(zhì)的表達(dá)及功能模式的目的。 蛋白樣品的提取制備是影響雙向電泳的關(guān)鍵性因素。樣品中常含有核酸、脂、多糖、鹽等影響蛋白質(zhì)的可溶性和雙向電泳重復(fù)性的物質(zhì)，以植物樣品為甚，植物中還含有大量的色素、酚、醌及其它多種次生代謝產(chǎn)物，嚴(yán)重的影響提取效率以及干擾電泳結(jié)果，而且不同的植物、植物的不同器官往往差別比較大，更給樣品提取工作增加復(fù)雜性。因此，

3、對(duì)植物進(jìn)行樣品提取研究探索，建立起相應(yīng)的雙向電泳技術(shù)體系，將對(duì)該植物的進(jìn)一步蛋白質(zhì)組學(xué)研究突破技術(shù)瓶頸。 本研究分兩部分，分別對(duì)溫郁金的地下塊莖莪術(shù)及地上葉片進(jìn)行了雙向電泳前樣品提取制備的探索研究，并建立了相應(yīng)的雙向電泳技術(shù)體系。第一部分通過(guò)采用超聲破碎、TCA/丙酮沉淀法、超速離心等方法提取了溫莪術(shù)蛋白，并進(jìn)行了7 cm和18 cm的雙向電泳，成功地建立了溫莪術(shù)的雙向電泳技術(shù)體系；第二部分，通過(guò)比較多種提取方案，篩選出兩種相對(duì)