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文檔簡介
1、本論文選用煙草脆裂病毒(TRV)和煙草為實驗材料,選擇煙草八氫番茄紅素去飽和酶基因(PDS)作為報告基因,以該基因沉默產(chǎn)生的植物葉片出現(xiàn)典型的光漂白現(xiàn)象,進行觀察。構建八氫番茄紅素去飽和酶基因(PDS)的病毒載體,侵染結果顯示目的基因PDS沉默導致煙草幼苗出現(xiàn)光漂白現(xiàn)象.采用RT-PCR的方法檢測目的基因PDS的沉默效果.結果顯示PDS基因mRNA被顯著降解。該體系的建立有利于將來對植物基因進行高通量功能分析。 根部吸收法操作簡
2、單,快速有效。通過用含有病毒載體的農(nóng)桿菌直接侵染植物的根部,在短期內(nèi),被侵染的植物就能發(fā)生目的基因的沉默。此方法可對注射法無法接種的更小幼苗進行接種,因此適用的植物范圍更廣,適用于大規(guī)?;蚬δ芊治?。 為了使VIGS技術大規(guī)模應用于植物基因功能研究,以及探討VIGS技術用于植物發(fā)育相關基因功能研究的可行性,本實驗對農(nóng)桿菌介導的病毒誘導基因沉默體系進行了優(yōu)化,探討了農(nóng)桿菌的接種濃度,接種植物的苗齡對病毒誘導基因沉默效率的影響。結果
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