四君子湯拆方對(duì)胃癌SGC-7901、BGC-823細(xì)胞株側(cè)群細(xì)胞增殖、凋亡的影響.pdf

1、目的：以胃癌SGC-7901、BGC-823細(xì)胞株通過流式細(xì)胞儀技術(shù)分選出的側(cè)群細(xì)胞（side population，SP）為研究對(duì)象，在四君子湯拆方作用下對(duì)兩株細(xì)胞的增值、凋亡、周期及凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)合四君子湯全方作用的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，闡明四君子湯作用于側(cè)群細(xì)胞的機(jī)制，并為后續(xù)實(shí)驗(yàn)打下基礎(chǔ)。
　　方法：
　　1.常規(guī)體外培養(yǎng)人胃癌細(xì)胞株高分化胃癌細(xì)胞株 MGC-803、中分化胃癌細(xì)胞株SGC-7901及低分化胃癌細(xì)胞

2、株BGC-823；
　　2.流式細(xì)胞儀分選SGC-7901及BGC-823胃癌細(xì)胞的SP，并檢測(cè)MGC-803細(xì)胞株中是否存在SP；
　　3.制備四君子湯各拆方含藥物血清；
　　4. CCK-8法檢測(cè)四君子湯拆方藥物血清干預(yù)前后SP細(xì)胞與非側(cè)群細(xì)胞（Non-side population,NSP）及未分選細(xì)胞增殖能力的變化；
　　5.流式細(xì)胞儀檢測(cè)藥物血清干預(yù)后SP細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡的變化；
　　6. We

3、stern blot檢測(cè)藥物血清干預(yù)后SP細(xì)胞中凋亡相關(guān)蛋白Bax及Bcl-2表達(dá)的變化情況。
　　結(jié)果：
　　1.對(duì)6個(gè)樣本的MGC-803細(xì)胞進(jìn)行SP的分選，分選比例均為0％；
　　2.在藥物血清干預(yù)后SP的168h細(xì)胞增值倍數(shù)均要低于生理鹽水對(duì)照組，差異明顯（p<0.05），且表現(xiàn)為與 NSP相比較高的現(xiàn)象（p<0.05，個(gè)別組 p＞0.05），與此同時(shí)SP在藥物血清干預(yù)后的增值抑制率低于NSP，差異較明顯（p<

4、0.05）；
　　3.隨著藥物血清作用時(shí)間的延長(zhǎng)，SP細(xì)胞的凋亡率逐漸升高（p<0.05），且大體表現(xiàn)出與NSP相比凋亡率較低的現(xiàn)象（p<0.05，個(gè)別組p＞0.05）；
　　4.隨著藥物血清干預(yù)時(shí)間的延長(zhǎng)，SP與對(duì)照組相比G1期逐步升高，G2期及S期逐步降低，藥物血清干預(yù)后SP的G1期低于NSP，G2期及S期高于NSP，以上比較差異較明顯（p<0.05，個(gè)別組p＞0.05）；
　　5.隨著藥物血清作用時(shí)間延長(zhǎng)，SP的

5、Bax蛋白的表達(dá)與對(duì)照組相比逐漸升高，且總體呈現(xiàn)與NSP相比較低的現(xiàn)象（p<0.05，個(gè)別組p＞0.05），Bcl-2蛋白的表達(dá)與對(duì)照組相比逐漸降低，且總體呈現(xiàn)與NSP相比較高的現(xiàn)象（p<0.05，個(gè)別組p＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.四君子湯各拆方藥物血清可以抑制胃癌SP細(xì)胞增殖，抑制增值機(jī)制為細(xì)胞周期的改變；
　　2.四君子湯各拆方藥物血清可以促進(jìn)胃癌SP細(xì)胞凋亡，促凋亡機(jī)制為促凋亡蛋白Bax的表達(dá)上調(diào)和抑凋