四君子湯藥物血清對人胃癌細(xì)胞株BGC-823、SGC-7901側(cè)群細(xì)胞生物學(xué)特性的影響.pdf

1、本文分析了四君子湯藥物血清對人胃癌細(xì)胞株BGC-823、SGC-7901側(cè)群細(xì)胞生物學(xué)特性的影響。本研究分為三個(gè)部分：
　　第一部分：人胃癌細(xì)胞株BGC-823、SGC-7901側(cè)群細(xì)胞檢測及分選。
　　目的：檢測胃癌細(xì)胞株中的SP細(xì)胞比例，并分選出SP細(xì)胞。
　　方法：選擇低、中分化程度的人胃癌細(xì)胞株BGC-823、SGC-7901,應(yīng)用流式細(xì)胞儀熒光激活分選法，以Hoechst33342染色，維拉帕米拮抗對照，檢測

2、2株人胃癌細(xì)胞株中的SP細(xì)胞比例，并分選出SP細(xì)胞。
　　結(jié)果：BGC-823 SP細(xì)胞比例為2.60％±1.25%，SGC-7901 SP細(xì)胞比例為2.53%±0.85%。
　　結(jié)論：人胃癌細(xì)胞株BGC-823、SGC-7901中存在一定數(shù)量的SP細(xì)胞，且可被分選，不同分化程度的腫瘤細(xì)胞SP細(xì)胞的比例存在一定的差異。
　　第二部分：人胃癌細(xì)胞BGC-823、SGC-7901側(cè)群細(xì)胞的生物學(xué)鑒定。
　　目的：從體

3、外增殖活力、侵襲能力、成瘤能力等方面對分選出的人胃癌SP細(xì)胞進(jìn)行生物學(xué)特征的初步鑒定，探討以SP細(xì)胞作為腫瘤干細(xì)胞研究切入點(diǎn)的可行性。
　　方法：通過細(xì)胞生長曲線（CCK-8法）、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)比較SP細(xì)胞與NSP細(xì)胞及未分選細(xì)胞的體外增殖活力；應(yīng)用細(xì)胞侵襲transwell試驗(yàn)比較胃癌SP與NSP及未分選細(xì)胞的侵襲能力差異；應(yīng)用異種移植NOD/ SCID小鼠成瘤實(shí)驗(yàn)比較胃癌SP與NSP細(xì)胞及未分選細(xì)胞的體內(nèi)成瘤能力差異；通過胃

4、癌SP體內(nèi)成瘤細(xì)胞分化現(xiàn)象鑒定其多向分化特性。
　　結(jié)果：細(xì)胞生長曲線顯示，BGC-823及SGC-7901 SP細(xì)胞的增殖能力明顯高于NSP細(xì)胞及未分選細(xì)胞（P<0.05）。平板克隆實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，BGC-823及SGC-7901 SP細(xì)胞克隆形成率大于大于NSP及未分選細(xì)胞(P＜0.05)。Transwell細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)顯示，BGC-823及SGC-7901 SP細(xì)胞侵襲力小于NSP細(xì)胞及未分選細(xì)胞（P＜0.05）。異種移植瘤實(shí)

5、驗(yàn)結(jié)果顯示，BGC-823及SGC-7901 SP細(xì)胞在最早成瘤時(shí)間、瘤體生長曲線及最終成瘤重量上均顯示出較NSP細(xì)胞及未分選細(xì)胞強(qiáng)的成瘤能力。胃癌SP細(xì)胞與NSP細(xì)胞及未分選細(xì)胞成瘤后，均可轉(zhuǎn)化成不同分化程度的胃癌細(xì)胞。
　　結(jié)論：人胃癌細(xì)胞株BGC-823、SGC-7901的SP細(xì)胞具有較NSP細(xì)胞及未分選細(xì)胞強(qiáng)的體外增殖活力、成瘤能力，侵襲力較弱，具有多向分化特性，符合腫瘤干細(xì)胞特性，SP細(xì)胞富集腫瘤干細(xì)胞，可以作為腫瘤干細(xì)

6、胞研究的切入點(diǎn)。
　　第三部分：四君子湯藥物血清對人胃癌細(xì)胞株BGC-823、SGC-7901側(cè)群細(xì)胞生物學(xué)特性的影響。
　　目的：從體外增殖活力、成瘤能力研究四君子湯藥物血清干預(yù)后對人胃癌SP細(xì)胞生物學(xué)特性的影響，為中藥四君子湯在胃癌的治療及相關(guān)應(yīng)用提供客觀的實(shí)驗(yàn)及理論依據(jù)。
　　方法：制作動(dòng)物藥物血清，高效液相色譜分析法檢測血清藥效濃度，藥物血清干預(yù)胃癌SP細(xì)胞后通過細(xì)胞生長曲線（CCK-8法）、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)比

7、較對體外增殖活力的影響，應(yīng)用異種移植NOD/ SCID小鼠成瘤實(shí)驗(yàn)比較對體內(nèi)成瘤能力的影響。
　　結(jié)果：高效液相色譜分析法顯示藥物血清存在人參皂甙Rg1的藥效成分，細(xì)胞生長曲線顯示，經(jīng)藥物血清干預(yù)后BGC-823、SGC-7901的SP及NSP組細(xì)胞增殖活力低于未經(jīng)干預(yù)組細(xì)胞（P＜0.05），異種移植瘤實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，經(jīng)藥物血清干預(yù)后BGC-823、SGC-7901的SP及NSP組細(xì)胞在瘤體生長曲線及最終成瘤重量上顯示出較未經(jīng)干預(yù)細(xì)