星形膠質(zhì)細(xì)胞微絲表達(dá)與細(xì)胞縫隙連接的關(guān)系及其在癲癇發(fā)病中的意義.pdf

1、目的:研究馬桑內(nèi)酯(CoriariaLactone，CL)和縫隙連接通道阻滯劑1-庚醇(1-hepatal，1-hep)對(duì)模擬神經(jīng)元興奮環(huán)境下即給予高濃度kcl作用下的星形膠質(zhì)細(xì)胞微絲F-actin的影響及其與縫隙連接通道的關(guān)系，以及它們?cè)诎d癇發(fā)病中的意義。 方法:利用改良McCarthy的方法培養(yǎng)星形膠質(zhì)細(xì)胞，制備細(xì)胞爬片，并對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行不同干預(yù)分組：A.正常對(duì)照組；B.高濃度的kcl作用組；C.kcl+CL組；D.kcl

2、+1-hep組；E.kcl+CL+1-hep組。每組再分為24，48小時(shí)作用時(shí)間亞組。采用直接免疫熒光法，用BODIPYFLphallacdin對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞F-actin進(jìn)行熒光染色。用激光掃描共聚焦顯微鏡觀察各組細(xì)胞骨架F-actin的結(jié)構(gòu)及分布，同時(shí)測(cè)定F-actin含量。 結(jié)果:培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)過(guò)GFAP免疫組化鑒定，陽(yáng)性率達(dá)90％以上。用激光掃描共聚焦顯微鏡測(cè)定細(xì)胞骨架F-actin含量，發(fā)現(xiàn)高濃度的kcl作用于星

3、形膠質(zhì)細(xì)胞24h，48h后，F(xiàn)-actin的熒光強(qiáng)度較對(duì)照組升高(P＜0.01)，同時(shí)給予kcl+CL作用于星形膠質(zhì)細(xì)胞24h，48h后F-actin的熒光強(qiáng)度較kcl組明顯升高(P＜0.01)，而同時(shí)給予kcl+CL+1-hep組熒光強(qiáng)度較kcl+CL組明顯降低(P＜0.01)。同一因素作用下24h作用組與48h作用組熒光強(qiáng)度未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。 結(jié)論:CL可引起星形膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)F-actin含量的升高，而通道阻滯劑