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文檔簡介
1、背景與目的:多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是一種以骨髓中單克隆漿細胞大量增生為特征的惡性增殖性疾病,目前發(fā)病機制仍未明確。近年來有研究發(fā)現(xiàn),MM的發(fā)生發(fā)展與甲基化有著密切的關(guān)系。本研究擬檢測MM患者、正常對照組及KM3細胞株中survivin基因、PDCD5基因和NOR1基因的甲基化水平,以探討其意義。
方法:收集于2012年8月-2012年12月在中南大學湘雅三醫(yī)院就診的5例多發(fā)性骨髓瘤患者骨髓標本(
2、均為復治患者),其中男性3例,女性2例,年齡從46至70歲,中位年齡58歲。對照組為5例非血液腫瘤患者骨髓標本,其中男性1例,女性4例,年齡從22至58歲,中位年齡40歲,缺鐵性貧血4例,巨幼細胞性貧血1例。以多發(fā)性骨髓瘤KM3細胞株為標本進行細胞培養(yǎng),取對數(shù)期生長期細胞用于提取基因組DNA。采用飽和苯酚一氛仿抽提法分別提取MM患者骨髓標本、非血液腫瘤患者骨髓標本及KM3細胞基因組DNA,BSP法檢測MM患者、對照組及KM3細胞株中su
3、rvivin基因、PDCD5基因和NOR1基因CpG島的甲基化水平。
結(jié)果:利用BSP法獲得了survivin基因、PDCD5基因、NOR1基因上游啟動子區(qū)域CpG島的CpG位點甲基化圖譜,根據(jù)甲基化位點指數(shù)值=mCpG/(CpG+mCpG),獲得結(jié)果如下:1)5例MM患者骨髓標本survivin基因啟動子區(qū)的CpG島的甲基化水平分別為1.0%、0.5%、0.0%、0.5%、0.0%,5例對照組骨髓標本survivin基因啟動
4、子區(qū)的CpG島的甲基化水平分別為0.5%、1.5%、2.5%、1.0%、0.0%,KM3細胞株中survivin基因啟動子區(qū)的CpG島的甲基化水平分別為0.0%。2)5例MM患者骨髓標本PDCD5基因正義鏈啟動子區(qū)的CpG島2的甲基化水平分別為0.0%、1.8%、0.0%、1.4%、0.0%,5例對照組骨髓標本PDCD5基因正義鏈啟動子區(qū)的CpG島2的甲基化水平分別為0.0%、0.0%、0.0%、1.4%、0.0%,KM3細胞株中PDC
5、D5基因正義鏈啟動子區(qū)的CpG島2的甲基化水平為0.0%。3)5例MM患者骨髓標本NOR1基因正義鏈啟動子區(qū)的CpG島3的甲基化水平分別為0.0%、3.8%、3.8%、0.0%、2.5%,5例對照組骨髓標本NOR1基因反義鏈啟動子區(qū)的CpG島3的甲基化水平分別為0.0%、1.2%、0.0%、0.0%、0.0%,KM3細胞株中NOR1基因的甲基化水平為100%。
結(jié)論:1)survivin基因啟動子區(qū)的CpG島在MM患者及非血液
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