優(yōu)勢免疫活化策略摸索及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　通過觀察小鼠免疫后前期抗原分布情況以及最終各個(gè)次級淋巴結(jié)的T細(xì)胞反應(yīng)，來探索兩者之間的相關(guān)性，從而嘗試建立一種方法學(xué)，通過前期抗原分布來預(yù)測最終次級淋巴結(jié)中的反應(yīng)強(qiáng)度，為最終的定向誘導(dǎo)活化提供一定的科學(xué)基礎(chǔ)。
　　材料與方法：
　　1.使用Event Blue染料以及OVA-488熒光蛋白來觀察免疫后抗原在各個(gè)次級淋巴結(jié)中的分布情況，并用CFSE標(biāo)記過的CD8+T細(xì)胞來觀察免疫后次級淋巴結(jié)中T細(xì)胞的增殖情況

2、，最后用Elispot檢測各部位在效應(yīng)期以及記憶期其T細(xì)胞反應(yīng)情況，將最終的細(xì)胞反應(yīng)情況與抗原分布情況進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　2.將蛋白、DNA以及rTTV形式的免疫原進(jìn)行組合使用，同時(shí)也進(jìn)行不同免疫途徑的組合，觀察免疫原以及免疫部位的改變是否會影響最終次級淋巴結(jié)中T細(xì)胞的反應(yīng)情況。
　　結(jié)果：
　　1.進(jìn)行后肢免疫之后抗原主要分布于iliac、腹股溝淋巴結(jié)，少部分分布于腋窩淋巴結(jié)，前肢免疫之后抗原主要分布于腋窩淋巴結(jié)，

3、且只是在這些部位中發(fā)生了T細(xì)胞的增殖。在隨后的效應(yīng)期以及記憶期T細(xì)胞反應(yīng)檢測中，后肢免疫在iliac、腹股溝淋巴結(jié)、腋窩淋巴結(jié)中活化的特異性免疫反應(yīng)要強(qiáng)于其余淋巴結(jié)，而前肢免疫在腋窩淋巴結(jié)中活化的反應(yīng)明顯高于其余淋巴結(jié)，兩種免疫方式都能在脾臟中誘導(dǎo)出較好的T細(xì)胞反應(yīng)。
　　2.將蛋白形式的免疫原換為DNA或者rTTV之后，不同的單一免疫途徑下觀察到的現(xiàn)象并沒有改變，后肢免疫活化iliac、腹股溝淋巴結(jié)以及腋窩淋巴結(jié)，而前肢免疫只是

4、活化腋窩淋巴結(jié)。在進(jìn)行前肢初免一后肢加強(qiáng)的實(shí)驗(yàn)中，相對于單一的前肢免疫，不僅僅是在腋窩淋巴結(jié)，在iliac和腹股溝淋巴結(jié)也誘導(dǎo)出較好的T細(xì)胞免疫反應(yīng)。
　　結(jié)論：
　　1.免疫初期的抗原分布情況決定著最終各部位在效應(yīng)期以及記憶期的T細(xì)胞反應(yīng)，在抗原到達(dá)的淋巴結(jié)中會發(fā)生T細(xì)胞的增殖，并最終形成較好的效應(yīng)性以及記憶性T細(xì)胞反應(yīng)。
　　2.抗原分布與T細(xì)胞反應(yīng)之間的這種關(guān)聯(lián)性，并不會因?yàn)榭乖问降母淖兌淖?且不同的免疫途徑