老年急性腎損傷的臨床研究及腎組織干細(xì)胞對(duì)腎小管上皮細(xì)胞損傷修復(fù)的影響.pdf

1、背景和目的：急性腎損傷(AKI)的發(fā)生率逐年增加，且發(fā)病率隨齡增多。腎小管上皮細(xì)胞損傷是AKI的主要病理基礎(chǔ)。近年來，干細(xì)胞在損傷的腎小管上皮細(xì)胞修復(fù)過程中發(fā)揮的作用備受矚目，特別是成體干細(xì)胞，但其機(jī)制尚不明確。本研究觀察了解放軍總醫(yī)院老年住院患者急性腎損傷的發(fā)生情況，探討了其病因及轉(zhuǎn)歸。同時(shí)我們?cè)隗w外分離培養(yǎng)腎組織干細(xì)胞，觀察腎組織干細(xì)胞對(duì)腎小管上皮細(xì)胞損傷修復(fù)的影響，為進(jìn)一步研究腎組織干細(xì)胞在老年AKI治療中的作用奠定基礎(chǔ)。

2、　　方法：1、采用回顧性臨床研究，收集2008年6月至2009年12月我院老年科住院患者的基本臨床資料。使用Logistic回歸模型分析和Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型對(duì)發(fā)病后1年達(dá)到終點(diǎn)事件的危險(xiǎn)因素以及生存情況進(jìn)行分析。2、從大鼠腎臟分離提取腎乳頭尖部細(xì)胞。對(duì)腎組織干細(xì)胞進(jìn)行表型鑒定以及分化潛能的誘導(dǎo)。3、人腎小管上皮細(xì)胞系(HKC)用濃度為0.1％μmol/L的抗霉素A建立體外缺氧復(fù)氧模型模擬體內(nèi)缺血再灌注過程。使用干細(xì)胞上清液以及共培養(yǎng)裝置

3、，觀察復(fù)氧后各時(shí)間點(diǎn)HKC的損傷情況以及干細(xì)胞的作用方式。
　　結(jié)果：1、2008年6月至2009年12月我院老年住院患者AKI發(fā)生率為10.8％，且隨年齡增長(zhǎng)而明顯增加。單因素病因分析顯示感染(39.2％)為最常見病因；多因素綜合病因分析顯示，老年患者AKI主要病因依次為感染(81.0％)、低血容量(67.2％)、藥物(64.1％)等。多變量Logistic回歸以及Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型分析顯示，多器官功能障礙綜合征(MODS)、消

4、化道出血、機(jī)械通氣、營(yíng)養(yǎng)不良是AKI患者達(dá)到透析或死亡等終點(diǎn)事件的危險(xiǎn)因素，可明顯影響AKI患者的存活時(shí)間。2、大鼠腎乳頭部組織干細(xì)胞呈玫瑰花形旋渦狀生長(zhǎng)，多呈短梭形和多邊形。細(xì)胞經(jīng)成脂誘導(dǎo)后油紅O染色陽性，成骨誘導(dǎo)茜素紅染色后可見橘紅色鈣鹽沉積。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)顯示腎乳頭部組織干細(xì)胞表達(dá)CD29，CD44，CD90陽性，CD45陰性。
　　3、通過凋亡壞死指標(biāo)的檢測(cè)，確定0.1μmol/L抗霉素A，缺氧30min復(fù)氧60min是合

5、適的模擬缺血再灌注細(xì)胞損傷模型。在缺氧復(fù)氧過程中，細(xì)胞ATP含量以及上清液總SOD的值隨著時(shí)間推移逐漸增高，MDA、LDH值隨時(shí)間推移逐漸下降，干細(xì)胞上清液干預(yù)以及共培養(yǎng)時(shí)這種現(xiàn)象更加明顯，且細(xì)胞凋亡率更低，對(duì)下室干細(xì)胞計(jì)數(shù)以及電鏡結(jié)果均提示干細(xì)胞通過微孔遷移到下室。
　　結(jié)論：1、老年住院患者AKI的發(fā)生率高，感染、低血容量、腎毒性藥物及心血管疾病是老年人發(fā)生AKI的常見原因。積極治療原發(fā)病，早期發(fā)現(xiàn)并預(yù)防AKI，減少M(fèi)ODS、