犬牙周膜牽張快速移動牙壓力側(cè)牙周組織中RANKL和OPG表達(dá)的研究.pdf

1、目的:
　　 通過建立Beagle犬牙槽隔減阻牙周膜牽張(periodontal ligamentdistraction,PDLD)快速移動牙齒的實(shí)驗(yàn)動物模型,觀察壓力側(cè)牙周組織中RANKL和OPG的表達(dá)變化,并比較其與常規(guī)正畸牙齒移動過程中RANKL和OPG表達(dá)的區(qū)別,探討RANKL和OPG在PDLD快速移動牙齒牙周組織改建過程中所起的作用,為研究PDLD快速移動牙齒過程中壓力側(cè)牙周組織改建的機(jī)制和臨床運(yùn)用提供理論依據(jù)。

2、>　　 方法:
　　 8只純種Beagle犬隨機(jī)分為A組(加力1周)、B組(加力2周)、C組(加力2周,保持2周)和D組(加力2周,保持4周),每組二只,拔除8只Beagle犬下頜兩側(cè)第二前磨牙,采用自身對照設(shè)計(jì),每只犬下頜的左右側(cè)隨機(jī)分為PDLD側(cè)和常規(guī)方法正畸牙齒移動對照側(cè)。以下頜第三前磨牙為支抗牙,下頜第一前磨牙為移動牙。上頜第一前磨牙為正常對照。PDLD側(cè)移動牙遠(yuǎn)中牙槽間隔行減阻術(shù),粘結(jié)牽張器,以2次/天的頻率、每次將

3、牽張器中螺旋擴(kuò)大器的螺旋旋轉(zhuǎn)90°,加力2周后固定保持。常規(guī)對照側(cè)用NiTi螺旋彈簧牽引移動牙向遠(yuǎn)中,力約1.47牛頓,加力2周后固定保持。測量移動牙移動距離。實(shí)驗(yàn)動物在預(yù)先規(guī)定的時(shí)間取材,固定,脫鈣,石蠟包埋,切片,HE染色觀察移動牙壓力側(cè)牙周組織的形態(tài)學(xué)變化;TRAP染色觀察壓力側(cè)牙周組織中破骨細(xì)胞數(shù)目的變化;免疫組化染色觀察移動牙壓力側(cè)牙周組織中RANKL、OPG的變化,應(yīng)用圖像分析系統(tǒng)對RANKL、OPG含量進(jìn)行半定量分析。并采

4、用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 結(jié)果:
　　 1牙齒移動距離.力口力1周時(shí),常規(guī)對照側(cè)牙齒向遠(yuǎn)中移動0.47±0.21mm,PDLD側(cè)為1.47±0.55mm,兩側(cè)牙齒移動距離存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。加力2周時(shí),常規(guī)對照側(cè)遠(yuǎn)中移動0.68±0.59mm,PDLD側(cè)為3.98±1.26mm,兩側(cè)牙齒總的移動距離存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。
　　 2 HE染色結(jié)果:加力后,常規(guī)

5、對照側(cè)移動牙壓力側(cè)牙周膜明顯縮窄,可見明顯無細(xì)胞結(jié)構(gòu)的玻璃樣變組織及潛掘性骨吸收,隨著時(shí)間的延長玻璃樣變組織逐漸被清除,牙槽間隔骨表面出現(xiàn)明顯破骨細(xì)胞及骨吸收陷窩。PDLD側(cè)牙周膜較常規(guī)對照側(cè)受壓縮窄程度輕,未見玻璃樣變組織,隨著加力時(shí)間的延長,遠(yuǎn)中固有牙槽骨彎曲或折斷并進(jìn)入拔牙窩,間隔骨周圍及內(nèi)部有大量破骨細(xì)胞,間隔骨吸收變薄,部分牙周膜與拔牙窩相通。加力2周,保持4周時(shí),PDLD和常規(guī)方法移動牙壓力側(cè)牙周膜寬度基本恢復(fù)。3壓力側(cè)牙周

6、組織中破骨細(xì)胞TRAP染色結(jié)果:PDLD側(cè)和常規(guī)對照側(cè)移動牙壓力側(cè)牙周組織中TRAP染色陽性破骨細(xì)胞在受力后均增加。PDLD側(cè)在加力2周時(shí),TRAP染色陽性破骨細(xì)胞個(gè)數(shù)達(dá)峰值。常規(guī)對照側(cè)在加力2周,保持2周時(shí)達(dá)峰值。PDLD側(cè)和常規(guī)對照側(cè)的破骨細(xì)胞個(gè)數(shù),在A組(P＜0.01)、B組(P＜0.01)和C組(P＜0.01)中均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。4壓力側(cè)牙周組織中RANKL、OPG的表達(dá)變化:RANKL、OPG陽性著色部位主要位于牙周膜成纖維細(xì)

7、胞、成骨細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、骨襯里細(xì)胞和骨陷窩內(nèi)破骨細(xì)胞的胞漿。在常規(guī)對照側(cè),加力后RANKL和OPG的表達(dá)均逐漸增強(qiáng),在加力2周,保持2周時(shí)RANKL的表達(dá)及RANKL/OPG含量比值達(dá)峰值,之后逐漸下降,而OPG的表達(dá)保持較高水平。在PDLD側(cè),加力后RANKL和OPG的表達(dá)均較強(qiáng),在加力2周時(shí)RANKL的表達(dá)及RANKL/OPG含量比值達(dá)峰值,之后逐漸下降,而OPG的表達(dá)繼續(xù)升高。在PDLD側(cè)和常規(guī)對照側(cè)的A組(P＜0.01)、B

8、組(P＜0.01)和C組(P＜0.05)中RANKL的表達(dá)均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。在PDLD側(cè)和常規(guī)對照側(cè)的A組(P＜0.01)、B組(P＜0.01)、C組(P＜0.01)和D組(P＜0.01)中OPG的表達(dá)均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。在PDLD側(cè)和常規(guī)對照側(cè)的A組(P＜0.01)、B組(P＜0.01)、C組(P＜0.05)和D組(P＜0.01)中RANKL/OPG含量比值均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 結(jié)論:
　　 1牙槽隔減阻牙周膜牽張移

9、動牙齒可以明顯加快正畸牙齒移動速度。
　　 2在觀察時(shí)間內(nèi),牙槽隔減阻牙周膜牽張快速移動牙壓力側(cè)的破骨細(xì)胞數(shù)高于常規(guī)正畸牙齒移動,顯示其壓力側(cè)發(fā)生較早與較快的骨吸收。
　　 3 RANKL和OPG參與牙槽隔減阻牙周膜牽張與常規(guī)正畸移動牙壓力側(cè)牙周組織的改建。RANKL/OPG含量比值的變化調(diào)節(jié)壓力側(cè)牙周組織中破骨細(xì)胞的產(chǎn)生及其吸收功能。與常規(guī)正畸牙齒移動相比,在牙槽隔減阻牙周膜牽張移動牙齒過程中RANKL、OPG的表達(dá)和