硫化氫對大鼠蝮蛇毒致急性肺損傷組織炎癥細胞因子的影響.pdf

1、目的：
　　觀察增加或減少H2S的生成對蝮蛇毒致大鼠ALI時組織炎癥細胞因子、核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子（NF-κB)和粘附分子（ICAM-1)變化的影響，探討H2S在蝮蛇毒致ALI炎癥過程中的作用機制。
　　方法：
　　1.分組：將健康成年雄性 SD大鼠36只采用完全隨機設(shè)計分為6組，每組6只，分別為Control組，空白對照組；S組，蝮蛇毒素組(注射劑量：1.5mg/kg)；S+ls組，蝮蛇毒素+低劑量NaHS組(注射劑量：0.

2、78mg/kg)；S+ms,蝮蛇毒素+中劑量NaHS組(注射劑量：1.56mg/kg)；S+hs,蝮蛇毒素+高劑量NaHS組(注射劑量：3.12mg/kg)；S+PPG組，蝮蛇毒素+炔丙基甘氨酸組(注射劑量：30mg/kg)。
　　2.方法：將Control組和剩余組分別腹腔注射生理鹽水和蝮蛇毒素3h后，Control組和S組、S+ls、ms、hs組及S+PPG組分別各自腹腔注射生理鹽水、低中高劑量NaHS以及PPG，待注射腹蛇毒

3、素6h后處死大鼠留取大鼠肺組織標(biāo)本和采集保存血漿。觀察光鏡下肺組織病理學(xué)變化并進行大鼠肺損傷病理評分（HE染色）；測定血清中IL-1β和IL-10含量（ELISA法)；測定肺組織中IL-1β、IL-10和ICAM-1mRNA水平變化（RT-PCR法)；測定肺組織 NF-κBp65的蛋白表達（western-blot法)。
　　結(jié)果：
　　1.光鏡肺組織病理學(xué)變化及肺損傷病理評分（IQA)：
　　同Control組正常肺

4、組織結(jié)構(gòu)相比較，S組肺組織中間隔增厚，炎性細胞浸潤及紅細胞漏出溶解，可見部分肺泡透明膜形成，存在肺泡塌陷，肺組織結(jié)構(gòu)完整性明顯破壞，肺損傷病理評分（IQA）明顯升高（P＜0.01）。與S組比較，S+ls組肺損傷未見改善（P＞0.05），S+ms組，S+hs組肺損傷較前減輕，但仍可見肺組織間隔增厚，少量炎性細胞浸潤，及少量紅細胞漏出，肺泡腔內(nèi)透明膜較前減少，肺泡結(jié)構(gòu)尚完整，IQA顯著下降（P＜0.01），但比Control組仍有明顯肺損傷

5、；S+PPG組肺損傷明顯加重，廣泛透明膜形成，肺泡塌陷及肺不張，IQA升高（P＜0.05）。
　　2.血清中IL-1β、IL-10含量的變化
　　①蝮蛇毒組與空白對照組比較血清中IL-1β、IL-10濃度表達顯著升高（P＜0.01）；
　　②蝮蛇毒+NaHS中、高劑量組血清中IL-1β濃度與蝮蛇毒組比較明顯降低；低劑量組變化不明顯（P＞0.05）；
　　③蝮蛇毒+NaHS中、高劑量組血清中IL-10濃度明顯升高（

6、P＜0.05或P＜0.01）。低劑量組變化不明顯（P＞0.05）；
　?、茯笊叨?PPG組血清中IL-1β濃度與蝮蛇毒組比較明顯升高，IL-10濃度與蝮蛇毒組比較明顯降低（P＜0.05或P＜0.01）。
　　3.肺組織ICAM-1、IL-1β、IL-10 mRNA基因表達的變化
　　①蝮蛇毒組與空白對照組比較，肺組織中ICAM-1、IL-1β、IL-10 mRNA基因表達均顯著升高（P＜0.01）；
　?、隍笊叨?/p>

7、+NaHS低、中、高劑量組肺組織中IL-1β和ICAM-1mRNA基因表達與蝮蛇毒組比較明顯降低（P＜0.05或P＜0.01）。；
　?、垓笊叨?NaHS中、高劑量組肺組織中IL-10 mRNA基因表達與蝮蛇毒組比較明顯升高（P＜0.05），低劑量組變化不明顯（P＞0.05）；
　?、茯笊叨?PPG組肺組織中IL-1β、ICAM-1 mRNA基因表達與蝮蛇毒組比較明顯升高，肺組織中IL-10 mRNA基因表達與蝮蛇毒組比較明

8、顯降低（P＜0.05）。
　　4. NF-κB p65蛋白表達的變化
　?、衮笊叨窘M與空白對照組比較，肺組織中NF-κBp65蛋白表達顯著升高（P＜0.01）；
　　②蝮蛇毒+NaHS高劑量組 NF-κBp65蛋白表達與蝮蛇毒組比較明顯降低（P＜0.05），中、低劑量組變化不明顯（P＞0.05）；
　?、垓笊叨?PPG組與蝮蛇毒組比較NF-κBp65蛋白表達明顯升高（P＜0.05）。結(jié)論：
　　1.外源性增