硫化氫對蝮蛇毒致大鼠急性肺損傷氧化應(yīng)激的調(diào)節(jié)作用.pdf

1、目的： 腹腔注射蝮蛇毒素建立急性肺損傷模型，觀察增加或減少H_2S的含量對氧化保護(hù)及氧化損傷指標(biāo)的影響，探討H_2S/CSE體系對蝮蛇毒素致大鼠急性肺損傷氧化應(yīng)激的調(diào)節(jié)作用。
　　方法： 1.分組：采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)將36只雄性清潔級(jí)SD大鼠分成6組，每組6只，分別為：①生理鹽水對照組(N組)；②蝮蛇毒素組(S組)；③蝮蛇毒素＋低劑量NaHS組(S+L組)；④蝮蛇毒素＋中劑量NaHS組(S+M組)；⑤蝮蛇毒素＋高劑量NaHS組(S+

2、H組)；⑥蝮蛇毒素＋PPG組(S+PPG 組)。 2.方法：①將N組腹腔注射等容積生理鹽水，其余組分別腹腔注射蝮蛇毒素。②3h后，N組和S組分別腹腔注射等容積生理鹽水；S+L, S+M, S+H組和S+PPG組，分別腹腔注射0.78mg/kg,1.56mg/kg和3.12mg/kg劑量的NaHS和30mg/kg劑量的PPG。③6h 后，將各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死，采集心臟血并分離留取血清，取相應(yīng)肺組織留作標(biāo)本。④肺組織HE染色光鏡觀察病理學(xué)變化

3、并行病理學(xué)評(píng)分，測定肺組織濕/干重比，去蛋白法檢測血漿H_2S含量，亞甲基藍(lán)法測定肺組織CSE活性，WST-1法測定肺組織勻漿超氧化物歧化酶(SOD)活力，酶促反應(yīng)谷胱甘肽消耗法測定肺組織谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)活力，酶聯(lián)免疫法(ELISA)法測定肺組織8-異構(gòu)前列腺素(8-iso-PGF2α)含量。
　　結(jié)果： 1.肺組織濕/干重比(W/D)變化：與N組相比較，S組W/D值升高(P0.01)。與S組相比較，不認(rèn)為S+L組

4、W/D值下降存在差異 (P0.05)；S+M, S+H組W/D值均有明顯下降(P0.01)；S+PPG組W/D值升高(P0.05)。 2.光鏡下肺組織病理學(xué)變化及肺損傷病理評(píng)分(IQA)：與N組正常肺組織相比，S組肺泡結(jié)構(gòu)明顯紊亂、破壞，肺泡結(jié)構(gòu)不完整，明顯肺泡水腫，大量透明膜形成，肺間質(zhì)明顯增厚，肺間質(zhì)及肺泡大量紅細(xì)胞及粒細(xì)胞浸潤，可見肺不張，IQA顯著升高(P0.01)。與S組相比較，S+L組肺組織損傷未見明顯改善 (P0.05)，

5、S+M,S+H組上述肺損傷情況有所減輕，肺泡結(jié)構(gòu)基本完整，但仍見肺泡間隔增厚，炎細(xì)胞浸潤，肺泡腔內(nèi)有少量紅細(xì)胞漏出，偶見透明膜，IQA明顯下降(P0.01)；S+PPG組肺損傷明顯加重，肺泡塌陷及肺不張明顯，多量肺泡見廣泛透明膜形成，IQA升高(P0.05)。 3.血漿H_2S含量及肺組織CSE活性變化：與N組比較，S組血漿H_2S含量和肺組織CSE活性明顯降低(P＜0.01)。與S組比較，S+L組血漿 H_2S含量和肺組織CSE活性未

6、見明顯變化(P＞0.05)，S+M, S+H組血漿H_2S含量和肺組織CSE活性均顯著升高(P＜0.01)；S+PPG組血漿H_2S含量及肺組織CSE活性降低(P＜0.01或 P＜0.05)。 4.肺組織勻漿SOD及GSH-Px活力變化：與N組相比較，S組肺組織勻漿SOD及GSH-Px活力明顯下降(P0.01)。與S組相比較，不認(rèn)為 S+L組肺組織勻漿SOD及GSH-Px活力升高存在差異(P0.05)，S+M, S+H組肺組織勻漿SOD

7、及GSH-Px活力均有明顯上升(P0.01)；S+PPG組肺組織勻漿SOD及GSH-Px活力減低(P0.05或 P＜0.05)。 5.肺組織勻漿8-異構(gòu)前列腺素(8-iso-PGF2α)含量的變化：與N組相比較，S組肺組織8-iso-PGF2α含量明顯升高(P0.01)。與S組相比較，不認(rèn)為S+L組肺組織8-iso-PGF2α含量下降存在差異(P0.05)，S+M, S+H組肺組織8-iso-PGF2α含量均有明顯下降(P0.01)；S