c-Jun氨基末端蛋白激酶(JNK)誘導孤兒受體TR3磷酸化的分子機理.pdf

1、c-Jun氨基末端蛋白激酶(c—Jun NH2—terminalprotein kinase，JNK)家族是促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)超家族成員之一。以JNK為中心的信號通路可被細胞因子、生長因子、應激等多種因素激活。大量實驗證實，JNK信號通路在細胞分化、細胞凋亡、應激反應以及多種人類疾病的發(fā)生與發(fā)展中起著至關重要的作用。 核孤兒受體TR3是一種立早基因(immediate early gene)的產物，與固醇類激素受體

2、結構相似，是核受體超家族的重要成員之一。TR3可被多種生長因子或凋亡誘導劑誘導表達，具有復雜的生物學功能，涉及細胞增殖、分化發(fā)育和凋亡的調控過程。 我們實驗室前期實驗已經證明，JNK激活劑Anisomycin能誘導TR3磷酸化，并在構建的一系列TR3缺失突變體(TR3△C574、TR3△N98、TR3△N50、TR3△N74、TR3△N84、TR3△N92)中推測JNK磷酸化TR3的位點可能在93—98氨基酸殘基之間(93—AT

3、S*PAS—98)，因為此序列中含有JNK磷酸化的典型模式序列S*P。本文中，我們進一步證實，Anisomycin通過激活JNK1(而非p38和ERK)誘導TR3磷酸化，該過程可以被JNK上游激酶MAPKK4和MAPKK7調控。通過構建新的TR3點突變(即將TR3第95位絲氨酸突變?yōu)楸彼?，我們證實了JNK磷酸化TR3的精確位點位于TR3的第95位絲氨酸。進一步研究表明，JNK磷酸化TR3與TR3泛素化密切相關。磷酸化為泛素的結合提供

4、了錨定位點，促進TR3的泛素化降解。另外，JNK磷酸化抑制TR3與DNA應答元件的結合，抑制TR3的轉錄激活能力。在HEK293T細胞中，TR3能夠促進細胞的DNA合成，而JNK磷酸化則破壞TR3有絲分裂原的活性。 總之，我們的研究不僅第一次確定了JNK磷酸化TR3的精確位點，而且將磷酸化和泛素化的研究緊密結合起來，發(fā)現(xiàn)JNK通過磷酸化和泛素化調控TR3的部分信號途徑。這些研究可能為闡明JNK和TR3在某些腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用機