電針與尼莫地平對(duì)AD大鼠海馬CA3區(qū)α7煙堿型乙酰膽堿受體的影響.pdf

1、目的：⑴觀察D-半乳糖所致衰老型AD模型大鼠與正常大鼠之間存在的空間學(xué)習(xí)記憶行為、海馬區(qū)α7nAchR免疫陽(yáng)性細(xì)胞及整個(gè)海馬組織中α7nAchR蛋白表達(dá)的差異。⑵觀察“益智醒腦”電針?lè)ê湍崮仄椒謩e及聯(lián)合干預(yù)在2周、4周、6周三個(gè)時(shí)間點(diǎn)對(duì)AD大鼠空間學(xué)習(xí)記憶行為、海馬區(qū)α7nAchR免疫陽(yáng)性細(xì)胞及整個(gè)海馬組織中α7nAchR蛋白表達(dá)的影響。⑶探討“益智醒腦”電針?lè)ㄅc尼莫地平影響大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的可能機(jī)制。
　　方法：經(jīng)Morris

2、水迷宮定位航行試驗(yàn)粗篩后的健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠210只，隨機(jī)分為正常組、模型組、電針治療組、尼莫地平治療組、聯(lián)合治療組、電針?lè)茄ㄎ唤M、多奈哌齊組7個(gè)組，每組30只，每個(gè)組設(shè)2周、4周、6周三個(gè)時(shí)間觀察點(diǎn)，每個(gè)觀察點(diǎn)的大鼠數(shù)量為10只。除正常組外，其余各組大鼠均予以腹腔注射D-半乳糖60mg/kg·d，6周后完成造模。造模后第7天，電針治療組大鼠選取百會(huì)、內(nèi)關(guān)、腎俞、足三里四個(gè)穴位，以頻率為3Hz、強(qiáng)度為1-2

3、mA的疏密波進(jìn)行電刺激，15min/d。尼莫地平治療組大鼠予以每只大鼠尾靜脈注射尼莫地平0.25mg/d。聯(lián)合治療組使用上述兩種方法同時(shí)進(jìn)行治療。電針?lè)茄ㄎ唤M選取的電針刺激部位為穴位旁5mm非經(jīng)絡(luò)經(jīng)行部位的肌肉組織，電針治療儀所有參數(shù)設(shè)置同電針治療組。多奈哌齊組予以每只大鼠多奈哌齊0.125mg/d灌胃。各組中各觀察點(diǎn)大鼠分別在其相應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行腦組織灌注固定取材和新鮮組織快速取材，SP免疫組織化學(xué)法檢測(cè)大鼠腦內(nèi)海馬區(qū)α7nAchR免疫

4、陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá)，western blotting法檢測(cè)整個(gè)海馬組織中α7nAchR蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：⑴與正常組大鼠相比，模型組大鼠在2周、4周、6周三個(gè)時(shí)間點(diǎn)均出現(xiàn)逃避潛伏期的明顯延長(zhǎng)（P<0.01）、撤去平臺(tái)后跨臺(tái)次數(shù)明顯減少（P<0.05）、目標(biāo)象限停留時(shí)間百分比明顯降低（P<0.01）和搜索策略發(fā)生改變。與模型組相比，電針治療組大鼠在4周時(shí)出現(xiàn)逃避潛伏期的縮短（P<0.01）、撤去平臺(tái)后跨臺(tái)次數(shù)的增加（P<0.05）和

5、目標(biāo)象限停留時(shí)間百分比的增高（P<0.01），6周時(shí)出現(xiàn)搜索策略的改變；尼莫地平治療組大鼠在2周時(shí)出現(xiàn)逃避潛伏期的縮短（P<0.01）、撤去平臺(tái)后跨臺(tái)次數(shù)的增加（P<0.05）和目標(biāo)象限停留時(shí)間百分比的降低（P<0.01），6周時(shí)出現(xiàn)搜索策略的改變；⑵尼莫地平治療組4周時(shí)出現(xiàn)撤去平臺(tái)后跨臺(tái)次數(shù)的減少（與2周、6周比較，P<0.05）和目標(biāo)象限停留時(shí)間百分比的降低（與2周、6周比較，P<0.05）；⑶正常組大鼠海馬CA3區(qū)α7nAchR染

6、色陽(yáng)性細(xì)胞體積大，染色深，形態(tài)規(guī)則，細(xì)胞數(shù)量多；模型組大鼠海馬CA3區(qū)α7nAchR染色陽(yáng)性細(xì)胞染色淺，數(shù)量少；電針治療組2周時(shí)無(wú)明顯變化，4周時(shí)細(xì)胞染色加深，數(shù)量增多，6周時(shí)細(xì)胞數(shù)量明顯增多，體積增大；尼莫地平治療組2周時(shí)細(xì)胞染色深，數(shù)量增多，但形態(tài)不規(guī)則；4周時(shí)細(xì)胞染色變淺，體積變小，形態(tài)結(jié)構(gòu)紊亂，6周時(shí)細(xì)胞染色深，形態(tài)較規(guī)則；⑷電針治療組4周、6周時(shí)，尼莫地平治療組2周、6周時(shí)和聯(lián)合治療組2周、4周、6周時(shí)出現(xiàn)海馬α7nAchR蛋