神經(jīng)型乙酰膽堿受體α7的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)研究.pdf

1、配體門控離子通道(LGICs)是一類離子型受體或通道受體。它們是一類由化學(xué)信使(如內(nèi)源性神經(jīng)遞質(zhì))打開或關(guān)閉的跨膜離子通道。配體門控的離子通道與嚴重危害人類健康的神經(jīng)系統(tǒng)疾病密切關(guān)聯(lián),可作為神經(jīng)系統(tǒng)疾病藥物的作用靶點。但是,關(guān)于配體門控離子通道的結(jié)構(gòu)與功能知識的缺陷一直是阻礙神經(jīng)系統(tǒng)疾病治療發(fā)展的關(guān)鍵障礙。
　　 我們以一種與神經(jīng)系統(tǒng)重大疾病相關(guān)的藥物作用靶點——神經(jīng)型乙酰膽堿受體(nAChR)α7亞型為研究切入點,重點關(guān)注和解

2、決神經(jīng)型乙酰膽堿受體(nAChR)α7亞型結(jié)構(gòu)這一關(guān)鍵科學(xué)問題,綜合采用分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)、結(jié)構(gòu)生物學(xué)等學(xué)科的方法和手段,解析其的三維晶體結(jié)構(gòu)及其與配體結(jié)合的復(fù)合物結(jié)構(gòu),試圖通過三維結(jié)構(gòu)的解析,闡明其配體結(jié)合及門控機制等基本生物學(xué)過程,為藥物研發(fā)提供結(jié)構(gòu)和理論基礎(chǔ)。
　　 我們已利用由實驗室團隊所發(fā)展的獨特、高效的哺乳動物細胞表達系統(tǒng),篩選得到了能夠進行體外異源高表達的神經(jīng)型乙酰膽堿受體(nAChR)α7亞型的物種cDNA,

3、表達量達到了毫克級別。同時,利用該物種cDNA,通過大規(guī)模表達純化,得到了高純度,高產(chǎn)量的神經(jīng)型乙酰膽堿受體(nAChR)α7全長的體外五聚體形式蛋白,最終實現(xiàn)了該蛋白在表達純化上的突破,為其結(jié)構(gòu)解析奠定了基礎(chǔ)。同時,我們也初步利用常規(guī)坐滴法以及最新發(fā)展的Biclle-Lipid方法嘗試篩選了神經(jīng)型乙酰膽堿受體(nAChR)α7亞型的晶體生長條件,這些研究都對神經(jīng)型乙酰膽堿受體(nAChR)α7亞型三維結(jié)構(gòu)的成功解析有很大幫助。我們也拿