α7煙堿型乙酰膽堿受體影響彌漫性軸索損傷后學(xué)習(xí)記憶能力的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究目的：
　　探討α7煙堿型乙酰膽堿受體（α7 nAChR）對大鼠彌漫性軸索損傷（DAI）后學(xué)習(xí)記憶能力的影響。
　　研究方法：
　　1. DAI后大鼠腦內(nèi)α7 nAChR表達(dá)改變的研究：
　　使用自主研制的可同時(shí)產(chǎn)生瞬間角加速和線加速運(yùn)動(dòng)的實(shí)驗(yàn)裝置建立大鼠 DAI模型。54只SD大鼠隨機(jī)分入五組：正常對照組(n=10)；假損傷組（n=10）；DAI傷后7天組(n=12)；DAI傷后30天組（n=11）與DAI

2、傷后90天組（n=11）。正常組大鼠立刻處死，假損傷組大鼠予麻醉后固定于頭夾但不予致傷，DAI傷后7天組、DAI傷后30天組與DAI傷后90天組大鼠分別于致傷后7天、30天與90天后處死。取海馬、內(nèi)囊、腦干與胼胝體進(jìn)行免疫組化染色，檢測α7 nAChR的表達(dá)情況，使用Image-Pro Plus軟件對α7 nAChR表達(dá)進(jìn)行定量評估。
　　2.α7 nAChR影響大鼠DAI后學(xué)習(xí)記憶功能的研究：
　　127只DAI致傷SD大

3、鼠隨機(jī)分入4組：空白對照組(n=31)；生理鹽水組(n=32)；激動(dòng)劑組（n=33）；抑制劑組(n=31)；于傷后7天、30天與90天檢測DAI易損區(qū)域海馬，內(nèi)囊，腦干與胼胝體α7 nAChR及其mRNA表達(dá)。使用Western blot檢測各組α7 nAChR蛋白，Real-Time PCR檢測各組α7 nAChR的mRNA表達(dá)情況。使用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測各組大鼠平均速度、潛伏期、目標(biāo)象限路程百分比及時(shí)間百分比，以評價(jià)DAI大

4、鼠學(xué)習(xí)記憶水平。采用Pearson積差相關(guān)分析，研究各易損區(qū)α7 nAChR表達(dá)量與Morris水迷宮參數(shù)的相關(guān)性。
　　研究結(jié)果：
　　1. DAI后大鼠腦內(nèi)α7 nAChR表達(dá)改變的研究：與正常對照組相比，大鼠DAI后7天各易損區(qū)α7nAChR表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異。DAI后30天，各易損區(qū)α7nAChR表達(dá)顯著性減少，并維持低水平表達(dá)至傷后90天。
　　2.α7 nAChR影響大鼠DAI后學(xué)習(xí)記憶功能的研究：DA

5、I后7天，激動(dòng)劑組易損區(qū)α7nAChR表達(dá)與空白對照組、生理鹽水組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，抑制劑組易損區(qū)α7nAChR表達(dá)較空白對照組明顯降低。在傷后30天、90天，激動(dòng)劑組較空白對照組、生理鹽水組α7nAChR明顯增加，抑制劑組較空白對照組α7nAChR持續(xù)降低。同時(shí)Real-Time PCR顯示α7nAChR mRNA的表達(dá)與上述α7nAChR蛋白變化具有同步性。傷后7天，抑制劑組大鼠水迷宮實(shí)驗(yàn)潛伏期明顯增加，目標(biāo)象限路程及時(shí)間百分比明顯