青天葵及其組織培養(yǎng)物生藥鑒別和體外抗乙型肝炎病毒實驗研究.pdf

1、目的：對青天葵及其組織培養(yǎng)物進行化學成分預試和紫外光譜分析，并比較其異同，為青天葵質量標準研究提供生藥鑒別依據；對青天葵及其組織培養(yǎng)物和組織培養(yǎng)物各提取部位進行體外抗乙型肝炎病毒藥效學研究；初步判斷組織培養(yǎng)物是否能作為青天葵資源加以利用。 方法：采用化學成分預試方法來檢識青天葵及其組織培養(yǎng)物所含化學成分類型并比較其異同；采用紫外光譜線組法以石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水為溶劑，測定青天葵及其組織培養(yǎng)物紫外吸收，比較兩者吸收特征；以

2、2.2.15細胞為模型，加入藥物培養(yǎng)8d，顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，結合MTT法確定最大無毒濃度；用酶聯(lián)免疫法(ELISA法)檢測青天葵水提液、青天葵組織培養(yǎng)物水提液和青天葵組織培養(yǎng)物各提取部位對2.2.15細胞分泌的e抗原(HBeAg)和表面抗原(HBsAg)抑制作用。結果：化學成分預試表明青天葵及其組織培養(yǎng)物均含有氨基酸、多肽、蛋白質、有機酸等成分，所不同的是青天葵含有黃酮、酚、香豆素、內酯、強心苷、植物甾醇和三萜類成分，組織培養(yǎng)物含有

3、皂苷類成分，特征性強，可作為二者生藥鑒別方法。 青天葵石油醚提取液在223.0nm、270.0nm、287.0nm有吸收峰，乙酸乙酯提取液在267.0nm、270.0nm、320.0nm有吸收峰，正丁醇提取液在223.0nm、255.0nm、262.0nm有吸收峰，水提取液紫外無吸收。青天葵組織培養(yǎng)物石油醚提取液在222.0nm、272.0nm有吸收峰，乙酸乙酯提取液在270.0nm、276.0nm、285.0nm有吸收峰，正丁

4、醇提取液在223.0nm、262.0nm有吸收峰，水提取液在258.0nm、361.0nm、394.0nm有吸收峰。二者石油醚提取液在223.0±1.0nm和270.0±2.0nm、乙酸乙酯提取液在270.0nm、正丁醇提取液在223.0nm和26.0nm有相同吸收峰，青天葵水提取液紫外無吸收，而組織培養(yǎng)物水提取液紫外有吸收。紫外光譜特征性強，也可作為二者生藥鑒別方法。 青天葵水提液對HBeAg和HBsAg均具有抑制作用，對HB

5、eAg抑制作用強于對HBsAg抑制作用；青天葵組織培養(yǎng)物水提液對HBeAg和HBsAg均具有抑制作用，對HBsAg抑制作用強于對HBeAg抑制作用；青天葵組織培養(yǎng)物乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水部位對HBeAg和HBsAg均具有抑制作用，對HBsAg抑制作用強于對HBeAg抑制作用。 結論：本研究首次采用化學成分預試和紫外光譜線組法對青天葵及其組織培養(yǎng)物進行生藥鑒別研究，并以2.2.15細胞為模型，對青天葵及其組織培養(yǎng)物及組織培養(yǎng)