羅格列酮誘導(dǎo)人急性髓性白血病HL60細(xì)胞生長(zhǎng)抑制和凋亡作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體（peroxisome proliferator activated receptor gammar,PPARγ)配體羅格列酮(Rosiglitazone,ROZ)對(duì)人急性髓性白血病HL60細(xì)胞生長(zhǎng)和凋亡的影響及其作用機(jī)制。 方法：體外培養(yǎng)人急性髓性白血病HL60細(xì)胞，應(yīng)用不同濃度的羅格列酮和阿霉素處理人急性髓性白血病HL60細(xì)胞，采用 MTT比色法測(cè)定藥物對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用。用流式細(xì)胞術(shù)

2、、AO/EB熒光雙染色法觀察細(xì)胞凋亡率，并分析細(xì)胞周期改變，Western Blot法分析PPARγ、NF-κB、Bcl-2、bax蛋白表達(dá)的影響及PPARγ活化依賴性(先用PPARγ阻斷劑GW9662后，再處理檢測(cè))。 結(jié)果：MTT比色法結(jié)果顯示：25μmol/L以上濃度的羅格列酮可抑制體外培養(yǎng)的HL60細(xì)胞生長(zhǎng)，呈濃度依賴性。12.5μmol/L羅格列酮對(duì)HL60細(xì)胞無(wú)明顯抑制作用。羅格列酮抑制HL60細(xì)胞生長(zhǎng)IC50 值為

3、 49.59μmol/L。 AO/EB熒光雙染色法、流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示：50μmol/L以上濃度的羅格列酮能誘導(dǎo)HL60細(xì)胞凋亡，使細(xì)胞周期阻滯在G1期，呈濃度依賴性。 Western Blot法結(jié)果顯示：HL60細(xì)胞表達(dá)PPARγ，羅格列酮作用HL60細(xì)胞后上調(diào)PPARγ和Bax蛋白表達(dá)，下調(diào)NF-κB、Bcl-2蛋白表達(dá)作用,且呈濃度依賴方式和時(shí)間依賴方式(P＜0.05﹚。PPARγ阻斷劑GW9662能拮抗羅格列酮對(duì)