多-泛耐藥鮑曼不動桿菌耐藥機(jī)制研究和同源性分析.pdf

1、目的：了解皖北地區(qū)多耐藥甚至泛耐藥鮑曼不動桿菌臨床分布特征和對包括替加環(huán)素、多粘菌素E和利福平在內(nèi)的19種抗菌藥物的耐藥特性，為臨床合理應(yīng)用抗生素提供實(shí)驗室依據(jù)。檢測本組多/泛耐藥鮑曼不動桿菌的D類碳青霉烯酶和整合酶基因，探討其在介導(dǎo)多/泛耐藥性中的作用。分析本組多/泛耐藥鮑曼不動桿菌的同源性，為多/泛耐藥鮑曼不動桿菌的院內(nèi)感染防控提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　1.收集皖北地區(qū)三家醫(yī)院72株鮑曼不動桿菌，用法國生物梅里埃公

2、司生產(chǎn)的VITEK-32細(xì)菌鑒定系統(tǒng)的G－桿菌鑒定卡（GNI卡）將細(xì)菌鑒定到種；采用GNS-148藥敏試驗卡進(jìn)行16種臨床常用抗生素藥敏試驗，測定各種抗生素最低抑菌濃度（MIC）；用肉湯稀釋法進(jìn)行替加環(huán)素、多粘菌素E和利福平的藥物敏感性試驗，測定各抗生素的MIC值。
　　2.用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）擴(kuò)增D類碳青霉烯酶基因（OXA-51、OXA-23、OXA-24、OXA-58）和Ⅰ—Ⅲ類整合子的整合酶基因。
　　3.應(yīng)用重

3、復(fù)外基因回文結(jié)構(gòu)PCR（REP-PCR）分析細(xì)菌的同源性。結(jié)果：
　　1.臨床分布特征：72株臨床分離的鮑曼不動桿菌中，有75％（54/72）為多重耐藥菌株，25%（18/72）是泛耐藥菌株。多/泛耐藥鮑曼不動桿菌主要科室分布為ICU，構(gòu)成比是62.50%。呼吸道是感染發(fā)生的主要部位（構(gòu)成比為86.11%）。2.細(xì)菌藥物敏感性實(shí)驗結(jié)果：替加環(huán)素、多粘菌素 E、利福平體外藥敏試驗?zāi)退幝瘦^低，分別是5.56%、6.94%、16.67%

4、。臨床常用16種抗生素中除舒普深（頭孢哌酮/舒巴坦）耐藥率為41.67%外，其他抗生素耐藥率較高。碳青霉烯類耐藥率較高，亞胺培南76.39%，美羅培南77.78%，其他10種抗生素耐藥率接近100%。另外，通過本實(shí)驗發(fā)現(xiàn)一例對亞胺培南敏感但對美羅培南耐藥菌株。
　　3. D類碳青霉烯酶基因檢測結(jié)果顯示：72例標(biāo)本中僅11株不表達(dá)OXA-23碳青霉烯酶基因，其陽性率84.72%；OXA-51碳青霉烯酶基因陽性率100.00%；OXA

5、-24、OXA-58碳青霉烯酶基因未檢測到。
　　4.整合子檢測結(jié)果顯示：72例標(biāo)本中共6株不表達(dá)Ⅰ類整合子的整合酶基因intI-1，其陽性率91.67%，Ⅱ、Ⅲ類整合子的整合酶基因intI-2、intI-3未檢測到。
　　5.細(xì)菌同源性分析結(jié)果顯示：淮北市人民醫(yī)院標(biāo)本為同一克隆菌株，提示當(dāng)時可能存在院內(nèi)爆發(fā)流行；蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院標(biāo)本則為3株流行菌株的院內(nèi)流行播散；蚌埠醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院標(biāo)本條帶分析結(jié)果顯示為2個不同菌

6、株流行播散，但有8株細(xì)菌條帶不清晰，尚不能判斷是否只有2個不同菌株的院內(nèi)播散。未發(fā)現(xiàn)三家醫(yī)院之間耐藥菌株的克隆傳播。
　　結(jié)論：
　　1.臨床分離的鮑曼不動桿菌在本研究中已呈現(xiàn)對多種抗生素耐藥，甚至出現(xiàn)多個“泛耐藥”菌株。多/泛耐藥鮑曼不動桿菌對臨床常用抗生素耐藥形式嚴(yán)峻，舒普深是目前臨床應(yīng)用藥物中的首選。替加環(huán)素、多粘菌素E和利福平對多/泛耐藥鮑曼不動桿菌體外敏感性較好。
　　2.72株多/泛耐藥鮑曼不動桿菌的OXA