類固醇受體輔活化子-3在炎癥-免疫反應(yīng)中的作用.pdf

1、研究證實(shí)，嚴(yán)重創(chuàng)傷或感染后發(fā)生明顯的GCR(GR表達(dá)或功能下調(diào))、炎癥介質(zhì)(NF-κB、AP-1)功能增強(qiáng)和炎性細(xì)胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6等)大量分泌，三者相互影響，互為因果，形成級聯(lián)式放大效應(yīng)，引發(fā)SIRS。SIRS是創(chuàng)傷或感染后天然免疫反應(yīng)過度激活所致，是導(dǎo)致繼發(fā)性全身性損害的主要原因。伴隨SIRS的發(fā)生發(fā)展，由于內(nèi)源性抗炎癥介質(zhì)的過量釋放，可引起機(jī)體發(fā)生以細(xì)胞免疫為主的免疫功能抑制。因此，深入探討SIRS發(fā)生發(fā)展及

2、隨后免疫抑制的分子機(jī)制，具有重要的臨床意義。 SRC家族作為核受體和其它轉(zhuǎn)錄因子的轉(zhuǎn)錄輔活化子，由SRC-1、SRC-2和SRC-3組成，以配體依賴模式與核受體相互作用，通過組蛋白乙?；?甲基化和募集另外的輔因子，顯著增強(qiáng)核受體依賴的轉(zhuǎn)錄。盡管目前關(guān)于SRC蛋白在調(diào)節(jié)機(jī)體生長發(fā)育、能量代謝以及部分腫瘤形成等方面的研究已積累了很多資料，但關(guān)于它在炎癥/免疫反應(yīng)中的作用，目前知之甚少。 我們通過海外合作的方式從美國休斯頓貝勒

3、醫(yī)學(xué)院成功引進(jìn)SRC-3基因敲除小鼠的親代小鼠，并進(jìn)行了繁殖。在成功繁殖并鑒定的基礎(chǔ)上，我們分兩個部分探討了SRC-3在炎癥和免疫反應(yīng)中的作用。首先分別從體內(nèi)、體外兩方面探討了SRC-3在SIRS發(fā)生發(fā)展中的作用：1)以5mg/kg體重LPS腹腔注射為炎癥反應(yīng)動物模型，觀察SRC-3基因敲除對炎癥反應(yīng)早期炎性細(xì)胞因子分泌及肝、脾組織中GR、NF-κB、AP-1表達(dá)及核轉(zhuǎn)位的影響：2)在腹腔巨噬細(xì)胞原代培養(yǎng)的基礎(chǔ)上，在10μg/ml培養(yǎng)體

4、系LPS誘導(dǎo)下，從炎性細(xì)胞因子的基因轉(zhuǎn)錄、炎癥介質(zhì)的活性等方面觀察了SRC-3蛋白缺失對腹腔巨噬細(xì)胞激活的影響。其次通過細(xì)菌負(fù)荷實(shí)驗(yàn)觀察了SRC-3在天然免疫反應(yīng)中的作用，并在此基礎(chǔ)上，進(jìn)一步通過燒傷和LPS誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)模型，探討SRC-3與機(jī)體免疫功能抑制的關(guān)系。 結(jié)論： 1、SRC-3與炎性細(xì)胞因子的合成釋放有關(guān)，其蛋白缺失可抑制LPS誘導(dǎo)的TNF-α、IL-1β、IL-6的基因轉(zhuǎn)錄及釋放，改善炎癥反應(yīng)中機(jī)體的整體效

5、應(yīng)，緩解腹腔巨噬細(xì)胞的激活程度； 2、SRC-3對GR蛋白表達(dá)及核轉(zhuǎn)位有抑制作用，LPS刺激后GR蛋白表達(dá)及核轉(zhuǎn)位顯著降低，產(chǎn)生明顯的GCR，SRC-3蛋白缺失可緩解其程度： 3、SRC-3對NF-κB炎癥信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路有正性調(diào)控作用。SRC-3蛋白缺失可通過抑制炎癥反應(yīng)早期IκB-α水平下調(diào)，減少NF-κB核轉(zhuǎn)位，從而導(dǎo)致其基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控功能下降； 4、SRC-3參與AP-1炎癥信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的激活，SRC-3蛋白缺

6、失可抑制LPS誘導(dǎo)的AP-1蛋白表達(dá)水平及活性，這可能是由于TNF-α、IL-1β等致炎細(xì)胞因子合成釋放相對不足所致： 5、SRC家族成員間存在相互補(bǔ)償，SRC-1、SRC-2對SRC-3蛋白缺失具有不同程度的補(bǔ)償效應(yīng)，但這種補(bǔ)償效應(yīng)是有限的； 6、SRC-3在維持機(jī)體正常的免疫反應(yīng)中起重要作用。SRC-3缺失可抑制炎性細(xì)胞因子的轉(zhuǎn)錄和釋放，引起對細(xì)菌及產(chǎn)物的吞噬及清除功能下降，導(dǎo)致天然免疫功能減弱，同時引起CD3<'+