類固醇受體輔活化子-3在炎癥-免疫反應中的作用.pdf

1、研究證實，嚴重創(chuàng)傷或感染后發(fā)生明顯的GCR(GR表達或功能下調)、炎癥介質(NF-κB、AP-1)功能增強和炎性細胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6等)大量分泌，三者相互影響，互為因果，形成級聯(lián)式放大效應，引發(fā)SIRS。SIRS是創(chuàng)傷或感染后天然免疫反應過度激活所致，是導致繼發(fā)性全身性損害的主要原因。伴隨SIRS的發(fā)生發(fā)展，由于內源性抗炎癥介質的過量釋放，可引起機體發(fā)生以細胞免疫為主的免疫功能抑制。因此，深入探討SIRS發(fā)生發(fā)展及

2、隨后免疫抑制的分子機制，具有重要的臨床意義。 SRC家族作為核受體和其它轉錄因子的轉錄輔活化子，由SRC-1、SRC-2和SRC-3組成，以配體依賴模式與核受體相互作用，通過組蛋白乙酰化/甲基化和募集另外的輔因子，顯著增強核受體依賴的轉錄。盡管目前關于SRC蛋白在調節(jié)機體生長發(fā)育、能量代謝以及部分腫瘤形成等方面的研究已積累了很多資料，但關于它在炎癥/免疫反應中的作用，目前知之甚少。 我們通過海外合作的方式從美國休斯頓貝勒

3、醫(yī)學院成功引進SRC-3基因敲除小鼠的親代小鼠，并進行了繁殖。在成功繁殖并鑒定的基礎上，我們分兩個部分探討了SRC-3在炎癥和免疫反應中的作用。首先分別從體內、體外兩方面探討了SRC-3在SIRS發(fā)生發(fā)展中的作用：1)以5mg/kg體重LPS腹腔注射為炎癥反應動物模型，觀察SRC-3基因敲除對炎癥反應早期炎性細胞因子分泌及肝、脾組織中GR、NF-κB、AP-1表達及核轉位的影響：2)在腹腔巨噬細胞原代培養(yǎng)的基礎上，在10μg/ml培養(yǎng)體

4、系LPS誘導下，從炎性細胞因子的基因轉錄、炎癥介質的活性等方面觀察了SRC-3蛋白缺失對腹腔巨噬細胞激活的影響。其次通過細菌負荷實驗觀察了SRC-3在天然免疫反應中的作用，并在此基礎上，進一步通過燒傷和LPS誘導炎癥反應模型，探討SRC-3與機體免疫功能抑制的關系。 結論： 1、SRC-3與炎性細胞因子的合成釋放有關，其蛋白缺失可抑制LPS誘導的TNF-α、IL-1β、IL-6的基因轉錄及釋放，改善炎癥反應中機體的整體效

5、應，緩解腹腔巨噬細胞的激活程度； 2、SRC-3對GR蛋白表達及核轉位有抑制作用，LPS刺激后GR蛋白表達及核轉位顯著降低，產生明顯的GCR，SRC-3蛋白缺失可緩解其程度： 3、SRC-3對NF-κB炎癥信號轉導通路有正性調控作用。SRC-3蛋白缺失可通過抑制炎癥反應早期IκB-α水平下調，減少NF-κB核轉位，從而導致其基因轉錄調控功能下降； 4、SRC-3參與AP-1炎癥信號轉導通路的激活，SRC-3蛋白缺

6、失可抑制LPS誘導的AP-1蛋白表達水平及活性，這可能是由于TNF-α、IL-1β等致炎細胞因子合成釋放相對不足所致： 5、SRC家族成員間存在相互補償，SRC-1、SRC-2對SRC-3蛋白缺失具有不同程度的補償效應，但這種補償效應是有限的； 6、SRC-3在維持機體正常的免疫反應中起重要作用。SRC-3缺失可抑制炎性細胞因子的轉錄和釋放，引起對細菌及產物的吞噬及清除功能下降，導致天然免疫功能減弱，同時引起CD3<'+