沙棘籽渣黃酮對人乳腺癌細胞增殖抑制和凋亡誘導的研究.pdf

1、華東師范大學碩士學位論文沙棘籽渣黃酮對人乳腺癌細胞增殖抑制和凋亡誘導的研究姓名：毛玉昌申請學位級別：碩士專業(yè)：生物化學與分子生物學指導教師：錢旻章平20050501沙韓籽渣黃酮對人乳腺癌細胞增殖抑制和凋亡誘導的研究抑制人乳腺癌細胞Bcap37的增殖，這種增殖抑制效應可通過多途徑、多靶點的調(diào)節(jié)而實現(xiàn)。本課題在凋亡誘導效應的研究中，通過流式細胞術(shù)定量分析FHR作用以后Bcap37細胞的凋亡率，透射電鏡觀察細胞核形態(tài)的變化，瓊脂糖凝膠電泳檢測

2、DNALadder現(xiàn)象，以驗證FHR對Bcap37的凋亡誘導效應。并對細胞凋亡的線粒體通路進行研究，探討線粒體通路與FHR誘導Bcap37凋亡的關系。結(jié)果發(fā)現(xiàn)FHR作用Bcap37細胞24h后，亞G1期細胞比例隨著FHR的濃度升高而增加，所占比例從163％升高到834％，且G2／M期細胞的比例也有所提高。1000Itg／ml作用24h后，G0／G1期細胞比例降至3263％，S期的細胞比例高達3562％。透射電鏡觀察到對照組細胞核膜完整，

3、核形正常，核質(zhì)均勻，實驗組細胞核染色質(zhì)均出現(xiàn)邊集化現(xiàn)象，1000gg／ml濃度組細胞周圍可清楚地觀察到細胞膜向外突出形成凋亡小體。FHR(1000IIg／m1)作用Bcap37細胞24h后，可見較明顯的DNA片段化現(xiàn)象，而對照組無此現(xiàn)象出現(xiàn)。熒光顯微鏡定性檢測到發(fā)生線粒體跨膜電位損耗的細胞隨著沙棘籽渣黃酮作用時間的延長而增多。流式細胞術(shù)定量檢測結(jié)果顯示在FHR(1000“g／m1)作用2h后線粒體發(fā)生跨膜電位損耗的細胞比例為25％，但是

4、在4h時又下降為12％，在其后的4個小時內(nèi)這一比例持續(xù)增加，到作用8h達到最高為61％，，之后這一比例又下降，作用24h時為20％。HPLC檢測結(jié)果顯示與對照組相比Bcap37細胞在FHR作用3h和8h后線粒體細胞色素C分別為對照組的80％和54％。Caspasc9的酶活在FHR(1000lg／m1)作用0h、3h和8h后分別為O087士0003、0154士0001和O214士0002，分別為對照組的177倍和2，46倍。證實線粒體通路