耳葉水莧對ALS抑制劑的抗性及其ALS基因表達(dá)研究.pdf

1、耳葉水莧在稻田的危害日趨嚴(yán)重，芐嘧磺隆的防治效果越來越差。該草對ALS抑制劑類除草劑的交互抗性水平國內(nèi)外未見報道。本論文測定不同耳葉水莧生物型對4種ALS抑制劑的交互抗性，并利用熒光定量PCR技術(shù)研究了耳葉水莧的抗性分子機(jī)制，研究結(jié)果如下:
　　1、盆栽法測定結(jié)果表明，芐嘧磺隆對五種耳葉水莧生物型HZ001（浙江）、NB0143-05（浙江）、JX110（浙江）、JS039（江蘇）、AH014（安徽）的鮮重抑制50％劑量（ED50

2、值）分別為0.18、3.16、12.20、8.02和1.50gai/ha，生物型NB0143-05、JX110、JS039、AH014對芐嘧磺隆的抗性指數(shù)分別為44.63、67.90、17.59和8.37。五氟磺草胺、雙草醚、咪唑乙煙酸對敏感生物型HZ001的ED50值分別為0.16、0.19和0.24，NB0143-05、JX110、JS039、AH014等四種生物型對五氟磺草胺的抗性指數(shù)分別為5.43、4.96、3.73和4.55，

3、對雙草醚的抗性指數(shù)分別為4.60、5.05、2.17和3.63，對咪唑乙煙酸的抗性水平分別為6.45、2.60、4.16和1.96。這表明，浙江、江蘇和安徽的NB0143-05、JX110、JS039、AH014四種耳葉水莧生物型對芐嘧磺隆產(chǎn)生了中高水平抗性，且對三唑嘧啶類除草劑五氟磺草胺都產(chǎn)生了低水平交互抗性;對于嘧啶硫代苯甲酸酯類的雙草醚，NB0143-05、JX110和AH014產(chǎn)生了低水平交互抗性;NB0143-05和JS039

4、產(chǎn)生了低水平交互抗性。這是國內(nèi)外耳葉水莧抗芐嘧磺隆生物型對其他ALS抑制劑交互抗性的首次報道。
　　2、本研究獲得浙江、江蘇省稻田HZ001，NB0143-05，JS039和JX110四種耳葉水莧生物型ALS的全長序列，長度為2235bp，編碼667個氨基酸。耳葉水莧三種抗性生物型的ALS基因第93位的亮氨酸(CTC)都被脯氨酸取代(CCC)，但該突變位點不是ALS酶結(jié)合域氨基酸殘基與除草劑的結(jié)合位點。未見其保守區(qū)突變。
　

5、　3、本文采用實時熒光定量PCR技術(shù)，以β-actin為內(nèi)參基因，對耳葉水莧抗芐嘧磺隆生物型NB0143-05和敏感生物型HZ001在mRNA水平上進(jìn)行分析。結(jié)果表明，耳葉水莧幼苗在3-4葉期進(jìn)行芐嘧磺隆(0.1gai/ha)莖葉處理后第2、4、6d，生物型HZ001的ALS表達(dá)量分別是對照的1.23、2.74和2.41倍，生物型NB0143-05的ALS表達(dá)量分別是對照的1.83、4.45和2.72倍。這表明，耳葉水莧幼苗經(jīng)芐嘧磺隆處