SHRs醛固酮水平對腎臟纖維化與CD2AP的影響和依普利酮的作用.pdf

1、高血壓主要通過促進動脈粥樣硬化形成引起腎組織缺血性病變以及通過腎小球高壓力、高灌注和高濾過導致腎臟損害。醛固酮（aldosterone，ALD）是高血壓引起腎損害的因素之一，與其受體結(jié)合后，通過血流動力學和直接的細胞學效應發(fā)揮致纖維化的作用。目前認為足細胞裂孔隔膜的分子結(jié)構(gòu)和功能是維持腎小球濾過屏障的主要因素，CD2相關蛋白（CD2 associated protein，CD2AP）為其中重要蛋白之一，實驗發(fā)現(xiàn)CD2AP缺乏可造成腎小球

2、硬化。實驗顯示CD2AP在小鼠腎臟中主要表達于足突細胞、近端小管、遠端小管和集合管等。目前對高血壓CD2AP和腎臟纖維化相關性尚不明了。國外一些實驗發(fā)現(xiàn)，醛固酮在足細胞相關蛋白的表達中具有一定影響，這些實驗主要針對nephrin和podocin等，而缺乏醛固酮與CD2AP有關的實驗。依普利酮是新開發(fā)的具有高選擇性的醛固酮受體拮抗藥，不僅可以降低血壓，還可以對抗醛固酮的致器官纖維化作用。目前國內(nèi)關于螺內(nèi)酯抑制腎臟纖維化的實驗較多，但對于依

3、普利酮抑制腎臟纖維化的相關實驗較少見。 研究目的： 1、觀察自發(fā)性高血壓大鼠（spontaneously hypertensive rats，SHRs）血漿與組織醛固酮水平和腎臟纖維化與足細胞相關蛋白CD2AP水平的關系。 2、觀察SHRs腎小球與腎小管間質(zhì)CD2AP蛋白水平和腎臟纖維化之間的關系。 3、觀察應用大劑量醛固酮受體拮抗劑依普利酮（100mg/Kg體重·日）對SHRs血壓與醛固酮的影響和對腎臟

4、的保護作用。 材料與方法： 22只16周齡雄性SHRs，隨機分成干預組和未干預組，每組各11只，12只同齡WKY（Wistar-Kyoto）大鼠為對照組。每天給予干預組SHRs依普利酮懸濁液灌胃（按100 mg/kg，溶于2ml過濾水中），給予未干預組和對照組SHRs同體積過濾水灌胃。采用Tail-cuff法測量大鼠尾動脈收縮壓和舒張壓。留取血標本，測定血肌酐、尿素氮、尿酸和醛固酮。在第10周末處死大鼠，將腎臟標本制備成

5、組織勻漿，測定腎組織醛固酮。應用免疫組化方法檢測腎臟組織CD2AP蛋白及轉(zhuǎn)化生長因子β1（transforming growth factorβ1，TGF-β1）蛋白水平。行HE及Masson染色，檢測腎臟病理切片并進行評分，觀察腎臟纖維化的改變程度。 結(jié)果： SHRs收縮壓、舒張壓和平均壓明顯高于對照組（P<0．01），而未干預組SHRs明顯高于干預組（P<0．01）。干預組SHRs血清肌酐、尿素氮水平和未干預組與對照

6、組無差異（P>0．05）。干預組SHRs血漿和腎組織醛固酮水平高于對照組（P<0．05），未干預組SHRs腎組織醛固酮水平和對照組無差異（P>0．05）。未干預組SHRs腎小球和腎小管間質(zhì)Masson染色顯示明顯的膠原纖維增生，腎小管間質(zhì)HE染色可見小管擴張、間質(zhì)纖維化、炎性細胞和管型。干預組SHRs腎小球膠原纖維含量明顯低于未干預組和對照組（P<0．01），干預組和對照組腎小管間質(zhì)評分低于未干預組（P<0．05）。干預組和對照組SHR

7、s的TGF-β1蛋白水平明顯低于未干預組（P<0．01），而CD2AP蛋白水平明顯高于未干預組（P<0．01）。SHRs腎小球與腎小管間質(zhì)CD2AP蛋白水平和尿素氮、肌酐與尿酸無相關性（P>0．05），和其對應的TGF-β1蛋白水平、腎小球膠原纖維含量與腎小管間質(zhì)評分呈顯著負相關（r=-0．894、-0．921、-0．798和-0．532，P<0．01）。未干預組SHRs的腎臟組織醛固酮和對照組無差異（P>0．05）。 結(jié)論：

8、 1．中年齡SHRs的血漿醛固酮水平增高； 2．SHRs腎臟纖維化程度隨血漿醛固酮水平升高而加重，表示血漿醛固酮在腎臟纖維化過程中發(fā)揮著重要的促進作用； 3．大鼠血漿醛固酮水平與腎臟CD2AP蛋白水平呈負相關，表示血漿醛固酮水平的增高可能是CD2AP表達水平降低和足細胞損傷的原因之一； 4． SHRs腎小球與腎小管間質(zhì)CD2AP蛋白水平和腎臟纖維化呈顯著負相關，表示腎小球及腎小管間質(zhì)CD2AP蛋白水平降低，