血管緊張素Ⅱ1型受體短發(fā)夾環(huán)RNA抑制大鼠血管平滑肌細胞增殖的實驗研究.pdf

1、目的:血管平滑肌細胞(VSMC)是血管壁的主要組成部分.已證實,VSMC的異常增殖是動脈粥樣硬化、血管成形術(shù)后再狹窄等的主要病理基礎(chǔ),在血管內(nèi)膜增生及血管重塑中起重要作用.因而抑制VSMC過度增殖,對預防和治療術(shù)后再狹窄有重要意義.腎素—血管緊張素系統(tǒng)(RAS)不僅在調(diào)節(jié)血壓、維持水電解質(zhì)平衡等方面起重要作用,近來研究表明血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)是腎素血管緊張素系統(tǒng)的關(guān)鍵效應(yīng)分子,對血管平滑肌細胞、心肌細胞及成纖維細胞具有生長激素樣作用

2、,可能參與了阻塞性血管疾病如冠心病、血管成形術(shù)后再狹窄的發(fā)生.其中AngⅡ絕大部分功能由血管緊張素Ⅱ1型受體(AT1R)介導,AngⅡ與血管緊張素Ⅱ1型受體(AT1R)結(jié)合刺激VSMC肥大和增殖,導致血管壁增厚及管腔縮小,在血管重構(gòu)中占重要地位.為此我們構(gòu)建了鼠AT1R短發(fā)夾環(huán)RNA(shRNA)質(zhì)粒,并進行鑒定;并驗證其是否具有RNAi作用;轉(zhuǎn)染VSMC觀察大鼠血管平滑肌細胞增殖的變化并探討其可能機制.結(jié)論:1.構(gòu)建血管緊張素Ⅱ1型受

3、體短發(fā)夾環(huán)RNA質(zhì)粒成功,兩個質(zhì)粒pAT1R—shRNA均明顯抑制VSMC的AT1R的mRNA和蛋白表達,具RNAi作用;2.質(zhì)粒pAT1R—shRNA通過RNAi的作用抑制AT1R mRNA翻譯,從而抑制AT1R蛋白的表達進而拮抗AngⅡ誘導的VSMC增殖效應(yīng).同時AT2R功能代償性增加也起一定的抑制VSMC增殖作用.3.具RNAi作用的pAT1R—shRNA有望在以VSMC增生為主要病理特征的這類血管疾病(如動脈粥樣硬化、血管成形術(shù)