腫瘤相關(guān)巨噬細胞和MMP-9表達與肝癌轉(zhuǎn)移機制研究.pdf

1、目的:(1)檢測肝癌組織中腫瘤相關(guān)巨噬細胞(tumor-associated macrophages,TAMs)與基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表達,分析其表達水平與肝癌臨床病理特征及有無門脈癌栓的相關(guān)性。(2)體外觀察巨噬細胞與不同轉(zhuǎn)移潛能的人肝癌細胞株MHCC97H和SMMC7721共培養(yǎng)前后侵襲能力變化情況,并利用RT-PCR方法檢測共培養(yǎng)前后肝癌細胞株MMP-9mRNA表

2、達水平差異,探討二者在肝癌侵襲轉(zhuǎn)移中作用及其可能相關(guān)分子機制。
　　方法:(1)選取72例肝細胞癌手術(shù)切除標本,按有無門脈癌栓分為2組,采用免疫組織化學(xué)染色方法,檢測肝癌組織中TAMs和MMP-9的表達水平,分別探討其與肝癌臨床病理特征及門脈癌栓的關(guān)系并檢測其相關(guān)性;(2)采用Transwell小室共培養(yǎng)體系檢測不同轉(zhuǎn)移潛能的人肝癌細胞株MHCC97H和SMMC7721與巨噬細胞共培養(yǎng)前后侵襲能力變化情況,并測定肝癌細胞株MMP-

3、9mRNA共培養(yǎng)前后表達水平,探討巨噬細胞影響肝癌侵襲轉(zhuǎn)移的可能相關(guān)分子機制。
　　結(jié)果:(1)免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示:TAMs主要分布于癌內(nèi)和癌周組織,MMP-9則主要表達于胞漿中;在所檢測的72例肝癌組織標本中,二者在肝癌患者門脈癌栓組中的表達陽性率(68.6％和82.6%)均高于無門脈癌栓組(37.8%和43.2%),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);Spearman rank相關(guān)分析提示MMP-9表達與TAMs計數(shù)呈正相

4、關(guān)(r=0.474, P<0.01)。(2)巨噬細胞與不同轉(zhuǎn)移潛能的人肝癌細胞株MHCC97H和SMMC7721共培養(yǎng)24小時后肝癌細胞株侵襲能力顯著提高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001);隨著轉(zhuǎn)移潛能的逐步增加,相應(yīng)肝癌細胞株共培養(yǎng)前后侵襲能力增加幅度逐漸加大:SMMC7721< MHCC97-H;RT-PCR結(jié)果顯示其MMP-9mRNA表達增加幅度亦呈升高趨勢:SMMC7721

5、細胞共培養(yǎng)前后可能通過上調(diào)MMP-9mRNA表達而促進侵襲。
　　結(jié)論:(1)TAMs浸潤與MMP-9在肝癌中表達水平與肝癌血管侵犯尤其門脈癌栓密切相關(guān),且二者表達水平呈正相關(guān);提示TAMs可能通過促進肝癌細胞上調(diào)MMP-9表達介導(dǎo)肝癌侵襲轉(zhuǎn)移尤其是門脈癌栓形成。(2)MHCC97H和SMMC-7721與巨噬細胞共培養(yǎng)后其侵襲能力較共培養(yǎng)前均顯著增強,其分子機制可能與上調(diào)肝癌細胞MMP-9 mRNA表達有關(guān)。從而驗證巨噬細胞可能通