NPHP-8對線蟲纖毛形態(tài)和功能的影響及INS-1細胞囊泡胞吐胞吞偶聯(lián)的研究.pdf

1、本文主要包括兩個方面的內(nèi)容：
　?。?）線蟲nphp-8基因的研究
　　腎耗竭（Nephronophthisis）是一種在小孩和青年時期最常見的晚期腎功能衰竭遺傳性疾病。至今，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)有10個與之相關(guān)的基因（NPHP1-9 and NPHP11）。NPHP8/RPGRIP1L是在Joubert syndrome(JBTS)和Meckel syndrome(MKS)中發(fā)現(xiàn)的一個新的纖毛基因。但是，NPHP8的精確功能和它的突變

2、是怎樣引起人的這類疾病都是未知的。本文，我們研究了線蟲的nphp8同源基因并探討了它在感覺神經(jīng)元纖毛的功能。通過RACE分析，我們第一次確定了nphp-8的基因結(jié)構(gòu)，并發(fā)現(xiàn)了其啟動子區(qū)存在明顯的X-box序列。另外，NPHP-8與NPHP-4在纖毛過渡區(qū)有相互作用，nphp-8基因缺失的線蟲表現(xiàn)出不正常的染料吸收和趨化性的缺陷。本課題揭示了nphp-8/RPGRIP1L在纖毛的形態(tài)和纖毛介導(dǎo)的趨化性上的重要作用。
　?。?）胞吐偶

3、聯(lián)的胞吞研究
　　本課題主要是利用全內(nèi)反射熒光顯微鏡（TIRFM），通過轉(zhuǎn)染胞吐和胞吞相關(guān)的熒光標(biāo)簽，來研究囊泡分泌和籠形蛋白（clathrin）依賴的胞吞之間的時空關(guān)系。我們發(fā)現(xiàn)葡萄糖依賴的胞吞相關(guān)的籠形蛋白或者dynamin-1能在囊泡分泌之前或者之后聚集，并介導(dǎo)籠形蛋白依賴的快速或者慢速胞吞。通過囊泡回收的膜蛋白Syt7（Synaptotagmin7），我們也證實了籠形蛋白的聚集和消失確實與囊泡對它的內(nèi)容物回收相關(guān)。增強刺激