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1、實驗?zāi)康模?宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)是宮頸癌的癌前病變,對CIN的早期診斷和有效的治療,是預防宮頸癌發(fā)生的重要途徑。CIN的檢測和確定包括臨床檢查、細胞學、陰道鏡檢、活體組織檢查和病理學診斷,以及必要實驗室PCRDNA檢測分析等,隨著CIN診斷日趨成熟,細胞學聯(lián)合陰道鏡下活檢仍是CIN及早期宮頸癌可靠的早期診斷方法。國內(nèi)外大量研究表明,高危型HPV感染是C
2、IN及宮頸癌發(fā)病的直接原因,荷蘭病理學Dr.CJLM Meijer在阿姆斯特丹及沃卓倫的研究中證實,HPV高危型檢測診斷CIN的陰性預測值>99%,HPV DNA檢測與細胞學檢查聯(lián)合進行宮頸上皮內(nèi)瘤變的篩查,其篩查效率高于單獨使用細胞學檢查,研究結(jié)果提示聯(lián)合兩種方法的檢測率幾乎高達100%。 實驗方法: 1、研究對象 本實驗選取遼寧省腫瘤醫(yī)院婦科門診就診患者為研究對象,以陰道鏡下活檢病理為診斷標準,樣本量為90例
3、,CIN Ⅰ 30例,CINⅡ 30例,CINⅢ30例。 2、用雜交捕獲的方法檢測HPV DNA 采用Digene公司提供的雜交捕獲Ⅱ代(HC-Ⅱ)HPV DNA檢測系統(tǒng)進行檢測,試劑采用Digene公司提供的高危型HPV DNA試劑盒,檢測探針包括13種HPV亞型,即16、18、31、33、35、39、45、51、56、58、59、68型。主要步驟包括:(1)裂解;(2)雜交;(3)捕獲:(4)反應(yīng):(5)沖洗;(6)
4、收集信號;(7)結(jié)果判定:HPV DNA含量超過1pg/ml即RLU/CO比值大于1為陽性。 3、薄層液基細胞學檢測方法 專用采樣器采集宮頸脫落細胞,將標本保存盛有細胞保存液的小瓶中,標本經(jīng)系統(tǒng)處理后制成薄層涂片,95%酒精固定,巴氏染色,請有經(jīng)驗的病理醫(yī)生閱片,依據(jù)TBS細胞分類法做出判斷,結(jié)果判定:結(jié)果是ASCUS以上者為陽性。 4、陰道鏡下病理檢查 對陰道鏡下有白色病變、鑲嵌、腺體開口、異型血管
5、等可疑病變部位進行定點活檢,對鏡下正常者行常規(guī)4點活檢,活檢組織送病理。 5、統(tǒng)計學方法 實驗數(shù)據(jù)中各檢出率的差異分析采用x<'2>檢驗,顯著性差異界限為α=0.05,實驗數(shù)據(jù)采用SPSS12統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析。 實驗結(jié)果 1.高危型HPV感染組中CIN Ⅰ、CIN Ⅱ、CINⅢ的檢出率分別為51.6%、58.1%、93.5%。說明高危型HPV感染與CIN的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),病變程度愈高HPV感染率愈
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