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文檔簡介
1、目的:該實驗擬檢測WT-1基因在腎胚瘤各細胞中的表達情況,然后根據(jù)對WT-1和EGR-Ⅰ基因在腎胚瘤中表達情況的統(tǒng)計分析,探討其在腫瘤發(fā)生方面的作用;并且通過RT-PCR擴增產(chǎn)生32P標記的cDNA探針進行原位雜交,從cDNA文庫中篩選含有WT-1基因的克隆,進一步將WT-1基因連到表達載體導(dǎo)入腎胚瘤細胞系G401中表達,分子水平研究G401細胞的生長、凋亡及腫瘤逆轉(zhuǎn)情況,從而為研究WT1基因的功能提供參考,為基因水平治療腎胚瘤提供重要
2、的依據(jù).結(jié)論:(1)WT-1蛋白定位于細胞核內(nèi),正常腎臟腎小球內(nèi)皮細胞核染色較深,而腎小管核染色較淺.而EGR-Ⅰ蛋白定位于細胞質(zhì),正常腎臟的近曲小管和遠曲小管EGR-Ⅰ免疫組化胞質(zhì)染色均較深,而腎小球染色較淺.61例腎胚瘤樣品中有36(59%)例的胚基細胞發(fā)生WT-1免疫反應(yīng);61例腎胚瘤樣品中有56%樣品胚基發(fā)生EGR-Ⅰ免疫反應(yīng),87%樣品的上皮細胞發(fā)生免疫反應(yīng)結(jié)果表明胚基中WT-1和EGR-Ⅰ基因表達明顯相關(guān).(2)導(dǎo)入WT-1
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