牙胚的體外重建模式及相關(guān)免疫調(diào)控研究.pdf

1、組織器官的上皮-間充質(zhì)相互作用是細胞增殖、組織再生和形態(tài)形成所必需的。同樣，上皮-間充質(zhì)相互作用的時空表達調(diào)控決定了牙齒的發(fā)生、形態(tài)的形成和牙本質(zhì)的成熟和牙源性細胞的分化，在牙齒發(fā)生的初期，上皮-間充質(zhì)相互作用并分泌誘導(dǎo)因子，這些因子促進彼此細胞增殖、遷移、極化和分化，最終調(diào)控牙胚的形成。牙齒的發(fā)育研究證實牙胚細胞上皮-間充質(zhì)在發(fā)育的不同時期保留了發(fā)育的遺傳信息，能重組并形成牙齒樣組織。然而，這些研究僅限于對牙齒相關(guān)組織的形成觀察，而缺

2、乏對體外牙齒重建本身的生物學特性進行深入的研究。此外，牙齒在發(fā)育時期的分子及細胞調(diào)控采用常規(guī)方法難以進行相關(guān)研究，因此在體外實現(xiàn)牙胚的重建對于我們了解牙齒發(fā)育與再生模式也具有重要的意義，但相關(guān)免疫調(diào)控機理研究并未闡明。因此，本試驗我們提供了不同的方式進行組織工程牙胚的構(gòu)建及相關(guān)免疫調(diào)控機制研究，為下一步實現(xiàn)真正意義上的牙齒再生修復(fù)提供理論依據(jù)。
　　我們比較了牙胚細胞在體內(nèi)腎被膜下、腸系膜內(nèi)和皮下移植的生長與發(fā)育情況，為進一步明確

3、牙齒的體外重建探尋合適的生長環(huán)境。結(jié)果表明移植于腎被膜下的牙胚生長良好，可見釉質(zhì)和牙髓牙本質(zhì)復(fù)合體，其余移植模式未見進一步發(fā)育趨勢，皮下構(gòu)建的牙胚部分從皮膚脫落而喪失，而在腸系膜內(nèi)可見大量浸潤的淋巴細胞。在此基礎(chǔ)上，我們采用大鼠牙胚間充質(zhì)細胞和牛真皮基質(zhì)蛋白構(gòu)建了可注射組織工程牙齒并探討了在體內(nèi)腎被膜移植的成牙能力研究的可行性。組織工程牙胚移植后2周可在腎被膜下形成典型的牙髓牙本質(zhì)復(fù)合體樣組織和釉質(zhì)樣結(jié)構(gòu),為進一步探討臨床應(yīng)用及相關(guān)免疫

4、調(diào)控，我們觀察了異體牙胚細胞重建后的免疫反應(yīng)，明確誘導(dǎo)免疫抑制藥物他克莫司對免疫相關(guān)因子的影響。腸系膜移植后移植物內(nèi)可見大量浸潤的淋巴細胞，應(yīng)用他克莫司后，CD4+T細胞和IL-2的分泌明顯下降，牙胚細胞可在大網(wǎng)膜內(nèi)進一步發(fā)育形成牙髓-牙本質(zhì)復(fù)合體。本試驗探索了牙齒體外重建方式及進一步發(fā)育的良好微環(huán)境。同時為以后牙胚細胞用于牙齒重建的臨床應(yīng)用提供了實驗基礎(chǔ)。
　　綜上所述，本研究首次對牙胚不同發(fā)育時期牙胚細胞的體外重建能力及移植模