大豆異黃酮聯(lián)合長(zhǎng)春瑞濱對(duì)兔VX2腫瘤模型影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、[目的]1．觀察大豆異黃酮聯(lián)合長(zhǎng)春瑞濱對(duì)兔VX2腫瘤組織皮下移植瘤模型的干預(yù)作用，并探討腫瘤發(fā)生時(shí)氧化與抗氧化失衡的相互關(guān)系；2．建立兔VX2腫瘤細(xì)胞肺移植瘤模型，并觀察其生物學(xué)特性與腫瘤生長(zhǎng)的關(guān)系。 [方法]1．采用兔VX2腫瘤組織懸液種植法(由中國(guó)第四軍醫(yī)大學(xué)附屬唐都醫(yī)院介入放射科張洪新副教授提供)在18只日本大耳白兔右側(cè)后腿皮下建立VX2腫瘤組織皮下移植瘤模型。將模型制備成功后的18只日本大耳白兔隨機(jī)分成3組，每組6只，分

2、別為對(duì)照組(A組)；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物以基礎(chǔ)飼料及自來(lái)水喂養(yǎng)；長(zhǎng)春瑞濱干預(yù)組(B組)：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物以基礎(chǔ)飼料及自來(lái)水喂養(yǎng)，并于種植VX2腫瘤組織懸液后第15天按205 mg/只劑量沿耳緣靜脈注射長(zhǎng)春瑞濱干預(yù)，第22天按2.0mg/只劑量沿耳緣靜脈注射長(zhǎng)春瑞濱干預(yù)；長(zhǎng)春瑞濱聯(lián)合大豆異黃酮干預(yù)組(C組)：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物除按B組劑量給予長(zhǎng)春瑞濱干預(yù)外，從種植VX2腫瘤組織懸液后第8天開(kāi)始在基礎(chǔ)飼料中按50 mg/kg/只/天劑量添加大豆異黃酮干預(yù)。全部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物從

3、種植VX2腫瘤組織懸液1周后開(kāi)始每周測(cè)量其右側(cè)后腿皮下移植瘤的長(zhǎng)徑(a)和短徑(b)，計(jì)算并比較瘤體生長(zhǎng)率(tumor-growth rate，TGR)。于種植VX2腫瘤組織懸液第30天采血制備血漿檢測(cè)超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量，并處死動(dòng)物觀察腫瘤轉(zhuǎn)移情況。2．無(wú)菌操作制備兔VX2腫瘤單細(xì)胞懸液，6只日本大耳白兔在清醒狀態(tài)下分別沿右側(cè)腋后線第7肋間注入活細(xì)胞數(shù)為1×10<'7>/ml的VX2腫瘤細(xì)胞懸液0.1 m

4、l建立兔VX2腫瘤細(xì)胞肺移植瘤模型。觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生存期及腫瘤生成率，并采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)腫瘤組織中凋亡相關(guān)基因bcl-2、bax蛋白的表達(dá)情況。 [結(jié)果]1.18只日本大耳白兔于右后腿皮下種植VX2腫瘤組織懸液1周后均在注射部位形成可觸及的實(shí)體瘤，成功率為100％。未發(fā)現(xiàn)兔VX2腫瘤組織后腿皮下移植瘤發(fā)生遠(yuǎn)處組織器官轉(zhuǎn)移。2.兔VX2腫瘤組織皮下移植瘤模型動(dòng)物在種植VX2腫瘤組織懸液第2周時(shí)喂飼大豆異黃酮的C組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物皮

5、下移植瘤生長(zhǎng)率較A組明顯降低，P<0.01。第2周開(kāi)始應(yīng)用長(zhǎng)春瑞濱干預(yù)后，B組實(shí)驗(yàn)兔皮下移植瘤生長(zhǎng)率較A組降低，P<0.05； C組瘤體生長(zhǎng)率較B組降低，P<0.05，較A組明顯降低P<0.01。第3周應(yīng)用長(zhǎng)春瑞濱第2次干預(yù)后，B組及C組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的皮下移植瘤生長(zhǎng)率均較A組明顯降低，P<0.01；C組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的皮下移植瘤生長(zhǎng)率低于B組，但差異不顯著，P>0，05。3.與A組比較：B組實(shí)驗(yàn)兔血漿MDA含量明顯升高，P<0.01，SOD活力明

6、顯降低，P<0.01；與B組比較：c組實(shí)驗(yàn)兔血漿MDA含量下降，P<0.05，SOD活力升高P<0.05。4.兔VX2腫瘤細(xì)胞肺移植瘤原位成瘤率為83.33％(5/6)，生存期為35.4±3.78天。腫瘤組織可侵犯周邊組織器官并發(fā)生遠(yuǎn)處器官轉(zhuǎn)移。5.5例兔VX2腫瘤細(xì)胞肺移植瘤模型腫瘤組織中Bcl-2蛋白陽(yáng)性表達(dá)4例(80％)，Bax蛋白陽(yáng)性表達(dá)1例(20％)，二者陽(yáng)性表達(dá)率比較未見(jiàn)顯著性差異，P>0.05。5例兔VX2腫瘤細(xì)胞肺移植瘤

7、模型腫瘤組織中Bcl-2和Bax蛋白均陽(yáng)性表達(dá)1例，均陰性表達(dá)1例。 [結(jié)論]1.按50 mg/kg/只/天的劑量在飼料中添加大豆異黃酮可以抑制兔VX2腫瘤組織皮下移植瘤的生長(zhǎng)，從而驗(yàn)證了大豆異黃酮的抗腫瘤作用。2.按50mg/kg/只/天的劑量在飼料中添加大豆異黃酮與長(zhǎng)春瑞濱聯(lián)合應(yīng)用，具有協(xié)同抑制兔VX2腫瘤組織皮下移植瘤生長(zhǎng)的作用。3.實(shí)驗(yàn)兔應(yīng)用長(zhǎng)春瑞濱干預(yù)后可能由于發(fā)生了血液毒性反應(yīng)而導(dǎo)致肺部感染，繼而使其體內(nèi)出現(xiàn)過(guò)氧化損