PKA-CREB和p38MAPK-ATF2通路調(diào)控DNA polβ表達在食管癌中的作用.pdf

1、鄭州大學(xué)博士學(xué)位論文PKACREB和p38MAPKATF2通路調(diào)控DNApolβ表達在食管癌中的作用姓名：趙繼敏申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：董子明20090501鄭州大學(xué)2009年博士學(xué)位論文中文摘要(altemariol，AOH)(又稱鏈格孢酚)具有致癌性。研究顯示AOH能夠損傷DNA。一般而言，DNA損傷作為一種信號，將誘導(dǎo)細胞應(yīng)激反應(yīng)，激活DNA修復(fù)系統(tǒng)基因，使表達增高，以修復(fù)損傷。AOH能否激活一定的細胞

2、信號系統(tǒng)，上調(diào)poll3表達，尚不清楚。由于倫理學(xué)問題使正常食管上皮取材困難，再加上正常食管上皮原代細胞擴大培養(yǎng)的難度的限制，故本課題選取毒理學(xué)實驗中常用的NIH3T3細胞為靶細胞，擬從觀察AOH對NIH3T3細胞的毒性和DNA損傷作用及轉(zhuǎn)化能力入手，尋找AOH激活NIH3T3細胞中DNApolg表達增高的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。在此基礎(chǔ)上，進一步研究食管癌EC9706細胞中這些信號通路的狀態(tài)，探討在食管癌細胞中這些信號通路與pol0表達的關(guān)系。

3、然后利用阻斷信號通路的方法，降低相關(guān)信號分子的活化、減少pol0表達，觀察對食管癌EC9706細胞生物學(xué)特性的影響和對化療藥物順鉑的敏感性的改變，為食管癌的治療提供新的思路。第一部分AOH對NIH3T3細胞生物學(xué)特性的影響和激活DNApolg表達的信號通路研究第一章AoH對NIH3T3細胞生物學(xué)特性的影響和誘導(dǎo)DNApolB表達方法1以10，20，100，200，500夥mol／L的AOH分別作用NIH3T3細胞24h和48h，M喊觀察

4、不同濃度的AOH對細胞增殖的影響；以10，20，100，200，500umol／L的AOH作用NIH3T3細胞4h，單細胞凝膠電泳實驗觀察AOH對DNA損傷程度；以10，20，100，200，500umol／L的AOH作用NIH3T3細胞24h，流式細胞術(shù)(FCM)檢測AOH對NIH3T3細胞周期的影響；以10，20，100，200，500肛mol／L的AOH作用NIH3T3細胞48h，將存活細胞傳代后，重復(fù)刺激48h，將細胞接種在六孔