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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:本實(shí)驗(yàn)利用MMTV-erbB-2轉(zhuǎn)基因小鼠,探討大豆異黃酮對(duì)不同鼠齡的MMTV-erbB-2轉(zhuǎn)基因小鼠乳腺癌發(fā)生、發(fā)展的影響,并利用免疫組化技術(shù)分析其潛在的作用機(jī)制。
方法:選擇雌性MMTV-erbB-2轉(zhuǎn)基因小鼠120只隨機(jī)分為四組,喂飼不同的飼料:早期干預(yù)組:喂飼豆飼料自鼠齡4周~12周;晚期干預(yù)組:喂飼豆飼料自鼠齡20周~60周;全程干預(yù)組:喂飼豆飼料自鼠齡4周~60周;對(duì)照組:喂飼不含異黃酮的對(duì)照飼料自鼠齡4
2、周~60周。觀察各組小鼠生長(zhǎng)發(fā)育,記錄不同鼠齡體重變化,Whole mount染色分析10周時(shí)乳腺整體形態(tài)結(jié)構(gòu),并用免疫組織化學(xué)染色SP法檢測(cè)10周時(shí)乳腺組織erbB-2蛋白表達(dá),同時(shí)觀察各組小鼠乳腺腫瘤的發(fā)病率和潛伏期、腫瘤生長(zhǎng)部位以及腫瘤生長(zhǎng)情況,并通過(guò)HE染色觀察其病理類型,免疫組織化學(xué)染色SP法檢測(cè)各組小鼠乳腺癌組織及正常乳腺組織中ERK1、ERK2和c-Fos蛋白的表達(dá)分析其作用機(jī)制。
結(jié)果:早期干預(yù)組和全程干預(yù)
3、組小鼠體重增長(zhǎng)較對(duì)照組和晚期干預(yù)組緩慢(P<0.05)。Whole mount染色TEB結(jié)構(gòu)計(jì)數(shù)對(duì)照飼料組干預(yù)小鼠較大豆異黃酮干預(yù)組明顯增多(P<0.05)。erbB-2表達(dá)在各組之間均有表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。各組小鼠腫瘤發(fā)生部位主要在第3對(duì)乳腺;各組小鼠腫瘤生長(zhǎng)速度差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);HE染色結(jié)果:導(dǎo)管原位癌13個(gè),浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌46個(gè),浸潤(rùn)性小葉癌8個(gè),不典型增生4例,肺轉(zhuǎn)移1個(gè)。各組小鼠乳腺癌的發(fā)病率
4、分別為48%,28%,20%和92%,與對(duì)照組比較,其他3組發(fā)病率均降低(P<0.01);各組小鼠乳腺癌潛伏期分別為(47.67±9.25)周、(47.29±14.13)周、(51.8±6.69)周和(49.91±8.07)周,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。ERK1、ERK2和c-Fos在乳腺癌陽(yáng)性表達(dá)率分別為71.6[%]、68.7[%]和61.2[%],在正常乳腺組織陽(yáng)性表達(dá)率分別為27.7[%]、19.1[%]和12.8[%
5、],差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);ERK1、ERK2和c-Fos在對(duì)照組癌組織陽(yáng)性表達(dá)率分別為85.7[%]、82.8[%]和74.3[%],早期干預(yù)組癌組織陽(yáng)性表達(dá)率分別為56.3[%]、56.3[%]和50[%],晚期干預(yù)組癌組織陽(yáng)性表達(dá)率分別為60[%]、50[%]和50[%],全程干預(yù)組癌組織陽(yáng)性表達(dá)率分別為50[%]、50[%]和33.3[%],與對(duì)照組相比,其它3組ERK1、ERK2和c-Fos陽(yáng)性表達(dá)均有所降低,但差異
6、無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
結(jié)論:1、MMTV-erbB-2轉(zhuǎn)基因小鼠在我國(guó)生長(zhǎng)良好,具有較強(qiáng)的繁殖能力,erbB-2基因傳代穩(wěn)定。2、大豆異黃酮干預(yù)對(duì)MMTV-erbB-2轉(zhuǎn)基因小鼠乳腺發(fā)育形態(tài)結(jié)構(gòu)具有一定的影響。3、大豆異黃酮對(duì)MMTV-erbB-2轉(zhuǎn)基因小鼠乳腺癌的發(fā)生具有預(yù)防作用,對(duì)乳腺腫瘤的早期預(yù)防可能具有指導(dǎo)意義。4、大豆異黃酮降低MMTV-erbB-2轉(zhuǎn)基因小鼠乳腺癌發(fā)生與ERK1/2,c-Fos無(wú)明顯相
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