基因槍法和農(nóng)桿菌介導基因AtAVP1、OsSIZ1、FNR-FLD對小麥幼胚愈傷組織的遺傳轉(zhuǎn)化.pdf

1、作為一種新的育種方法，基因工程已成為小麥遺傳改良的研究熱點。鹽堿、干旱、高低溫、離子毒害等非生物因子對小麥生長發(fā)育的危害日益加劇，已對我國小麥生產(chǎn)構成嚴重威脅。培育抗非生物脅迫同時又能提高其自身光合效率的小麥新品種，對提高小麥高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)具有重要意義。將來源于擬南芥中的液泡膜H+焦磷酸酶(H+-PPase)基因(AtAVP1)、水稻中的類泛素E3連接酶基因(OsSIZ1)、豌豆中鐵氧還蛋白還原酶(Ferredoxin NADP+-Redu

2、ctase)FNR基因和來自項圈藻(Anabaena)中的黃素氧還蛋白(Flavodoxin) FLD基因，通過分子克隆的方法整合到同一植物表達載體中。利用基因槍法和農(nóng)桿菌介導法對商用小麥品種鄭麥9023，華麥2152，華麥2566等幼胚誘導的愈傷組織進行遺傳轉(zhuǎn)化，期望獲得抗逆性增強、光合效率有所提高的小麥新材料。主要結果如下:
　　1.通過農(nóng)桿菌介導遺傳轉(zhuǎn)化的方法得到1株華麥2459、9株鄭麥9023和7株華麥2152抗生苗，經(jīng)

3、PCR檢測，沒有得到華麥2459陽性轉(zhuǎn)化子，得到鄭麥9023和華麥2152陽性轉(zhuǎn)化子各1株。
　　2.基因槍法得到15株華麥2566、4株BobWhite、9株中國春抗生苗，經(jīng)PCR檢測，沒有得到BobWhite陽性轉(zhuǎn)化子，得到華麥2566和中國春陽性轉(zhuǎn)化子各1株。
　　3.對農(nóng)桿菌介導法獲得84株華麥2152的T1代植株進行PCR檢測，沒有檢測到陽性植株，推斷其T0代可能為假陽性。
　　4.對農(nóng)桿菌介導法獲得的20株