普羅布考對(duì)糖尿病腎病大鼠腎組織轉(zhuǎn)化生長因子β1、血紅素加氧酶1干預(yù)作用的研究.pdf

1、目的：糖尿病腎病的發(fā)病機(jī)制中氧化應(yīng)激被認(rèn)為是中心環(huán)節(jié)。血紅素氧合酶-1是細(xì)胞氧化應(yīng)激過程一個(gè)非常敏感的指標(biāo)。糖尿病時(shí),腎臟組織HO-1可被顯著誘導(dǎo),起到抗氧化應(yīng)激、抗纖維化、抗炎癥反應(yīng)的作用。轉(zhuǎn)化生長因子β1是目前發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)的促腎間質(zhì)纖維化的因子。普羅布考是最強(qiáng)的人工合成抗氧化劑。本項(xiàng)目旨在探討普羅布考(PB)對(duì)糖尿病腎病(DN)大鼠模型腎組織轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)、血紅素加氧酶-1(HO-1)表達(dá)的干預(yù);闡明普羅布考延緩腎間

2、質(zhì)纖維化的機(jī)制。
　　方法：50只雄性SD大鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組行高糖高脂飲食,并以鏈脲佐菌素腹腔注射建立DN大鼠模型,將造模成功的34只大鼠隨機(jī)分為DN組和PB治療組。治療組經(jīng)口灌胃普羅布考(500mg/kg·d-1),灌胃治療第12周稱鼠重并查24h尿蛋白定量及尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG),處死大鼠抽取血液,觀察血清生化指標(biāo):血清膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL),低密度脂蛋白(LDL),血肌酐

3、(Scr)、尿素氮(BUN)、C反應(yīng)蛋白(CRP)。摘除腎臟行組織切片,觀察腎間質(zhì)纖維化程度,免疫組化檢測腎組織內(nèi)HO-1、TGF-β1的表達(dá),RT-PCR檢測腎組織內(nèi)TGF-β1、HO-1核酸水平。所獲結(jié)果采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)和組內(nèi)差異采用配對(duì)t檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：1、與NC組相比,DN組大鼠均有不同程度的攝食增多,精神不振,活動(dòng)遲緩,尿量增多,體重減輕,體毛雜亂無光澤。PB干預(yù)后以上情況有所改善。實(shí)

4、驗(yàn)結(jié)束時(shí)PB組大鼠體重(334.74±31.46)g與DN組(316.68±43.60)g及NC組(523.20±21.54)g比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。2、生化指標(biāo)與NC組相比,各模型組隨機(jī)血糖、TC、HDL、Scr、BUN、CRP、24h尿蛋白定量和尿NAG明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);PB組的上述指標(biāo)與DN組比較,則有明顯降低。與NC組相比,PB組、DN組HDL明顯降低;PB組HDL較DN組升高,差異有統(tǒng)計(jì)

5、學(xué)意義(P<0.05)。但PB組和DN組血糖無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。3、腎組織病理改變光鏡下,NC組未見腎小球、腎小管及間質(zhì)病變;DN組多數(shù)腎小球面積和體積明顯增大,腎小球基底膜增厚,腎小球系膜細(xì)胞增生、系膜區(qū)增寬,部分出現(xiàn)局灶腎小球硬化性改變;部分腎小管上皮細(xì)胞渾濁、空泡變性,管腔變窄;PB組病變較DN組減輕,部分腎小球毛細(xì)血管袢基膜增厚,腎間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤及纖維化較少(P<0.05)。與NC組相比,DN組、PB組腎組織TGF-β1表達(dá)增加(P

6、<0.05);與DN組比較,PB組TGF-β1表達(dá)減少(P<0.05)。與NC組相比,DN組、PB組腎臟組織HO-1表達(dá)增加(P<0.05);與DN組比較,PB組HO-1表達(dá)明顯增加(P<0.05)。4、腎組織TGF-β1、HO-1的核酸水平與NC組相比,DN組和PB組腎組織TGF-β1核酸水平上調(diào),但PB組低于DN組(P<0.05);與NC組比較,DN組和PB組腎組織HO-1核酸水平上調(diào),但PB組高于DN組(P<0.05)