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文檔簡介
1、目的:觀察內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum stress,ERS)相關(guān)因子肌醇需求蛋白1α(inositol requiring enzyme1alpha,IRE1α)、鈣網(wǎng)蛋白(calreticulin,CRT)在缺氧缺血性腦損傷新生大鼠腦皮質(zhì)中的表達(dá)變化及參附注射液對其表達(dá)的影響,探討參附注射液可能的腦保護(hù)機(jī)制。
方法:將新生7日齡Sprague-Dawley(SD)大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(S)和HIB
2、D模型組,模型組又分為生理鹽水對照組(C)、參附治療組(SF)。各組按照觀測的時間點(diǎn)不同分為3h、6h、12h、24h、72h五個亞組,每個亞組10只。參照Rice法制備新生大鼠HIBD模型,在各個時間點(diǎn)斷頭取右側(cè)皮質(zhì)腦組織,HE染色光鏡下觀察腦組織病理變化;逆轉(zhuǎn)錄-多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測皮層腦組織中IRE1α mRNA及CRT mRNA的表達(dá)變化;Western-Blot法測定IRE1α及CRT蛋白的表達(dá)變化。
3、結(jié)果:1.RT-PCR:生理鹽水對照組中IRE1αmRNA表達(dá)水平在3、6、12、24h時間點(diǎn)較假手術(shù)組升高(P<0.05),且在6h達(dá)到高峰;CRT mRNA表達(dá)水平在3h開始增加,12h達(dá)到高峰,隨后逐漸下降,72h時與假手術(shù)組比較差異仍有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。參附治療組中IRE1α mRNA及CRTmRNA各時間點(diǎn)的表達(dá)量均較假手術(shù)組明顯升高(P<0.05),表達(dá)趨勢與生理鹽水對照組一致,但在6、12、24、72h時間點(diǎn)的表
4、達(dá)量較生理鹽水對照組升高明顯(P<0.05)。2.Western-bolt;生理鹽水對照組和參附治療組中各時間點(diǎn)IRE1α蛋白表達(dá)量均較假手術(shù)組升高(P<0.05),表達(dá)高峰在缺氧缺血后12h;而CRT蛋白表達(dá)則從HI后6h開始升高,24h達(dá)到高峰,72h有所下降,但仍高于假手術(shù)組(P<0.05)。參附治療組IRE1α和CRT蛋白表達(dá)量在6、12、24、72h時間點(diǎn)較生理鹽水對照組升高明顯(P<0.05)。
結(jié)論:1.新生大鼠
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