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文檔簡介
1、目的:研究新生大鼠腦缺氧缺血后HAX-1和Omi/HtrA2在腦頂葉皮質神經元細胞胞質中的動態(tài)變化,進而探討Omi/HtrA2和HAX-1在新生大鼠HIBD中的作用及參附注射液(SFI)的干預作用。
方法:參照Rice法和陳惠金法制備新生大鼠HIBD模型,將新生7日齡SD大鼠隨機分為假手術組(S)、生理鹽水對照組(C)、參附治療組(SF),每組按術后觀察時間點不同進一步分為6h、12h、24h、72h四個亞組,每個亞組8只
2、大鼠。處死時觀察每只新生大鼠腦組織的大體形態(tài);采用HE染色,觀察假手術組和缺氧缺血組新生大鼠72h腦皮質組織的病理變化;采用免疫組化和Western Blotting法檢測各組病變側腦組織HAX-1和Omi/HtrA2蛋白的表達變化。
結果:(1)腦大體檢查:新生大鼠HIBD后C組結扎側半球腦組織受損嚴重,在24h時蒼白、水腫明顯,體積明顯大于對側,SF組大鼠未見上述改變或僅見結扎側腦半球輕微的水腫;S組大鼠大腦半球左右對
3、稱,未見任何病理變化。(2)腦組織病理變化:72h可見缺氧缺血組新生大鼠右側腦組織細胞排列紊亂,呈網狀或索條狀,神經細胞腫脹,局灶性細胞核固縮。(3)Western Blot結果示:C組和SF組Omi/HtrA2(6h、12h、24h、72h)、HAX-1(6h、12h)表達水平均較S組升高,其差別有統(tǒng)計學意義(P<0.01);C組Omi/HtrA2在HI后6h開始表達,24h達到高峰,隨后開始下降;C組HAX-1在HI后6h即開始增加
4、,隨后開始下降,72h仍高于S組。SF組Omi/HtrA2表達水平在12h、24h、72h較C組降低,其差別均有統(tǒng)計學意義(P<0.01);SF組HAX-1表達水平在12h,24h較C組增多,其差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。(4)免疫組化結果示:C組病變側大腦皮層胞漿和胞膜中,Omi/HtrA2陽性細胞數(shù)在HI后24h達到高峰,以后降低;HAX-1陽性細胞數(shù)在HI后6h即有高表達,隨后下降,與S組差別有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。<
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