HAX-1和Omi-HtrA2在缺氧缺血性腦損傷新生大鼠腦皮質(zhì)中的表達(dá)及參附注射液的保護(hù)作用.pdf

1、目的：研究新生大鼠腦缺氧缺血后HAX-1和Omi/HtrA2在腦頂葉皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞胞質(zhì)中的動(dòng)態(tài)變化，進(jìn)而探討Omi/HtrA2和HAX-1在新生大鼠HIBD中的作用及參附注射液(SFI)的干預(yù)作用。
　　 方法：參照Rice法和陳惠金法制備新生大鼠HIBD模型，將新生7日齡SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(S)、生理鹽水對(duì)照組(C)、參附治療組(SF)，每組按術(shù)后觀察時(shí)間點(diǎn)不同進(jìn)一步分為6h、12h、24h、72h四個(gè)亞組，每個(gè)亞組8只

2、大鼠。處死時(shí)觀察每只新生大鼠腦組織的大體形態(tài)；采用HE染色，觀察假手術(shù)組和缺氧缺血組新生大鼠72h腦皮質(zhì)組織的病理變化；采用免疫組化和Western Blotting法檢測(cè)各組病變側(cè)腦組織HAX-1和Omi/HtrA2蛋白的表達(dá)變化。
　　 結(jié)果：(1)腦大體檢查：新生大鼠HIBD后C組結(jié)扎側(cè)半球腦組織受損嚴(yán)重，在24h時(shí)蒼白、水腫明顯，體積明顯大于對(duì)側(cè)，SF組大鼠未見(jiàn)上述改變或僅見(jiàn)結(jié)扎側(cè)腦半球輕微的水腫；S組大鼠大腦半球左右對(duì)

3、稱，未見(jiàn)任何病理變化。(2)腦組織病理變化：72h可見(jiàn)缺氧缺血組新生大鼠右側(cè)腦組織細(xì)胞排列紊亂，呈網(wǎng)狀或索條狀，神經(jīng)細(xì)胞腫脹，局灶性細(xì)胞核固縮。(3)Western Blot結(jié)果示：C組和SF組Omi/HtrA2(6h、12h、24h、72h)、HAX-1(6h、12h)表達(dá)水平均較S組升高，其差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；C組Omi/HtrA2在HI后6h開(kāi)始表達(dá)，24h達(dá)到高峰，隨后開(kāi)始下降；C組HAX-1在HI后6h即開(kāi)始增加

4、，隨后開(kāi)始下降，72h仍高于S組。SF組Omi/HtrA2表達(dá)水平在12h、24h、72h較C組降低，其差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；SF組HAX-1表達(dá)水平在12h，24h較C組增多，其差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。(4)免疫組化結(jié)果示：C組病變側(cè)大腦皮層胞漿和胞膜中，Omi/HtrA2陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)在HI后24h達(dá)到高峰，以后降低；HAX-1陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)在HI后6h即有高表達(dá)，隨后下降，與S組差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。<