日本血吸蟲(chóng)期別、性別差異表達(dá)蛋白質(zhì)組研究.pdf

1、血吸蟲(chóng)病是一種危害嚴(yán)重的人獸共患寄生蟲(chóng)病，血吸蟲(chóng)生活史復(fù)雜，與終宿主有關(guān)的蟲(chóng)體有尾蚴、童蟲(chóng)、成蟲(chóng)、蟲(chóng)卵階段，從尾蚴侵入到雌蟲(chóng)成熟產(chǎn)卵在體內(nèi)經(jīng)歷了復(fù)雜的移行，發(fā)育過(guò)程。不同蟲(chóng)體在形態(tài)學(xué)和生物學(xué)上的變化也伴隨著不同的蛋白差異表達(dá)，導(dǎo)致血吸蟲(chóng)獨(dú)特的代謝和發(fā)育過(guò)程。 本實(shí)驗(yàn)收集日本血吸蟲(chóng)尾蚴、8天和19天童蟲(chóng)、42天雄蟲(chóng)、雌蟲(chóng)和蟲(chóng)卵，分別抽提可溶性及疏水性蛋白，建立24cm、pH3-11的高重復(fù)性銀染及考染雙向電泳圖譜，利用Imagem

2、aster2D軟件對(duì)電泳圖譜分析表明，在尾蚴、8天童蟲(chóng)、19天童蟲(chóng)、雄蟲(chóng)、雌蟲(chóng)、蟲(chóng)卵中分別檢測(cè)到可溶性蛋白斑點(diǎn)928±61、1465±41、1230±30、904±34、1080±26、1476±52個(gè)；疏水性蛋白斑點(diǎn)845±53、986±22、1145±35、1066±39、1123±45、1337±44個(gè)。圖譜比對(duì)顯示童蟲(chóng)、雌雄成蟲(chóng)蛋白之間圖譜相似性較高，其中8天與19天童蟲(chóng)蛋白圖譜相似性最高，尾蚴、蟲(chóng)卵與童蟲(chóng)和成蟲(chóng)蛋白相似性較低。

3、 在圖譜分析的基礎(chǔ)上用電噴霧線(xiàn)性離子阱質(zhì)譜(LTQ)或基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜(MALDI-TOF/TOFMS)對(duì)95個(gè)表達(dá)穩(wěn)定的差異、特異以及共有可溶性蛋白進(jìn)行鑒定，成功獲得了84個(gè)蛋白斑點(diǎn)的肽指紋圖譜及肽序列檢測(cè)數(shù)據(jù)，這些蛋白包括8天童蟲(chóng)蛋白29個(gè)、19天童蟲(chóng)蛋白16個(gè)、雄蟲(chóng)蛋白18個(gè)、雌蟲(chóng)蛋白12個(gè)、蟲(chóng)卵蛋白9個(gè)，分屬75種蛋白，其中60種有功能相關(guān)信息，數(shù)據(jù)庫(kù)檢索結(jié)果表明這些蛋白主要與細(xì)胞運(yùn)動(dòng)，蛋白折迭、修飾