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文檔簡介
1、1990年Wolff等在裸露DNA注射的局部觀察到蛋白的表達從而揭開了基因免疫研究的序幕,成為新型疫苗研制的熱點.基因疫苗與傳統(tǒng)疫苗不同之處在于其以DNA作為免疫原,且能長時間誘導(dǎo)機體的體液、細胞應(yīng)答.因此,我們嘗試以基因免疫代替常規(guī)的蛋白免疫來制備單克隆抗體.該研究中我們選擇乙肝病毒M蛋白的編碼基因PreS2/S為目的基因,將其克隆入真核表達載體,聯(lián)合應(yīng)用肌肉基因免疫和脾臟基因免疫方法,在BALB/c小鼠體內(nèi)誘生出特異性針對M蛋白的體
2、液免疫應(yīng)答,并將產(chǎn)生了較高抗體應(yīng)答水平的小鼠脾臟細胞與骨髓瘤細胞SP2/0細胞融合,以獲得分泌特異性單克隆抗體的雜交瘤細胞,從而為單克隆抗體的制備提供一條新的路線.該研究以基因免疫為基礎(chǔ),在小鼠體內(nèi)誘生抗M蛋白特異性免疫應(yīng)答,進而以雜交瘤技術(shù)成功制備了抗HBV M蛋白的單克隆抗體,建立了一種直接用基因免疫制備單克隆抗體的方法,它具備獨到的優(yōu)點,例如:在免疫過程中不再需要純化的蛋白抗原;能表達經(jīng)修飾的天然抗原;獲取方便,費用低廉.這種方法
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